T 细胞杀伤
细胞毒性 T 淋巴细胞 (CTL) 是免疫系统的重要组成部分,在感染细胞和恶性细胞的清除中扮演者重要的角色。CTL 是免疫系统的功能性 (CD8+) 细胞亚群,可释放穿孔素,在靶细胞膜上形成孔洞,颗粒酶通过这些孔洞进入细胞,诱导靶细胞凋亡。
免疫细胞诱导的细胞毒性可通过各种治疗药物诱导(例如,单克隆抗体、BiTE、CAR 和 Truck)。免疫系统被视为对抗癌症的有力手段,并且在肿瘤免疫学领域已有所成效。研究 T 细胞表型和细胞毒性功能的传统技术通常:
- 需要使用单独的仪器分开进行细胞因子、细胞毒性和标志物表达的分析
- 使用耗费人力的间接细胞毒性测定方法,例如铬释放实验
- 需要人工分析并从多个来源汇总数据
- 工作流程冗长、耗时;需要诸如方案优化、固定和反复清洗的步骤
iQue® 人 T 细胞杀伤分析应用,可利用 iQue® 人 T 细胞杀伤分析试剂盒对靶细胞杀伤、T 细胞表型和活化标志物的表达进行同步、高通量的分析,以及对效应蛋白和细胞因子的分泌进行定量。结合 iQue® 高通量流式细胞仪的强大功能和集成式 iQue® ForeCyt® 软件的实时数据分析,可为您提供简化的解决方案,改进肿瘤免疫学药物发现过程。
检测原理
关键优势
Key Advantages
洞察生物学结果
在生理相关的模型中评估 T 细胞杀伤
图 2.CD3×CD19 双特异性 T 细胞单链抗体 (BiTE) 在 6 天内可导致浓度依赖性的细胞杀伤、标志物表达和细胞因子释放。
将带有 Incucyte® Nuclight 绿色标记的 Ramos 细胞(15 K/孔)与 PBMCs(75 K/孔)接种到孔板中,进行共培养。使用 CD3×CD19 BiTE 抗体诱导活化。将细胞破碎,然后用 iQue® 人 T 细胞杀伤分析试剂盒分析细胞和上清液。(A) 靶细胞的活力在 6 天中呈浓度依赖性降低。(B) T 细胞活化标志物和 (C) 耗竭标志物在 CD8+ 细胞上的表达上升,至第 3 天,然后开始降低。(D) 释放的 IFNγ 和 (E) 颗粒酶 B 的浓度。
提高分析效率
在细胞和微球混合分析中,同时测定标志物的表达和分泌的细胞因子
图 3.应用 Immunocult CD3/CD28/CD2 活化因子诱导 T 细胞活化、耗竭和杀伤标志物的浓度和时间依赖性变化。
将带有 Incucyte® Nuclight 绿色标记的 Ramos 细胞(15 K/孔)与 PBMCs(75 K/孔)接种到孔板中,进行共培养。使用 Immunocult CD3/CD28/CD2 诱导活化,采用的最高浓度等同于建议的刺激浓度(25 µL 每 1e6 个细胞/mL)。将细胞破碎,然后用 iQue® 人 T 细胞杀伤分析试剂盒分析细胞和上清液。(A) 晚期活化的 T 细胞 (CD25) 在 CD8+ 细胞上的表达。(B) T 细胞耗竭 (PD-1) 在 CD8+ 细胞上的表达。(C) 释放的 IFNγ 和 (D) 颗粒酶 B 的浓度。
简化数据分析
实时数据分析和创新的可视化工具,支持快速生成定量读数
图 4.采用 iQue® ForeCyt® 上的预定义设门进行 T 细胞亚群的自动表型分析
将来自 3 个不同供体的 PBMCs(120 K/孔)与带有 Incucyte® Nuclight 绿色标记的 Ramos 细胞(40 K/孔)共培养,并用数量递增的 Dynabead CD3/CD28 进行活化。在第 3 天,使用 iQue® 人 T 细胞杀伤分析试剂盒进行分析。(A) 重叠图像展示了阳性(4:1,Dynabead:PBMC)和阴性(无 Dynabead)对照中 CD25 表达的差异。(B) 热图显示了来自每个供体的 PBMC 上 CD25 的表达(响应 Dynabead)。在较低的 Dynabead 密度下,供体 2 形成表型的敏感性要强于供体 1 和供体 3。(C) 图中将来自 (B) 图的数据汇总为浓度响应曲线。
订购信息
订购信息
平台:兼容 iQue® 3/iQue® Screener Plus - VBR 配置
产品 | 规格 | 产品目录号 |
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iQue® 人 T 细胞杀伤分析试剂盒 | 1 × 96 孔 | 97060 |
5 × 96 孔 | 97061 | |
1 × 384 孔 | 97062 | |
5 × 384 孔 | 97063 |