利用高通量流式细胞仪进行细胞计数和细胞活力评估

细胞计数和细胞活力

细胞计数是一种标准的实验室方法,常用于从生命科学到医学诊断的许多实验工作流程中。将细胞计数评估与细胞活力相结合是表征细胞健康状况的重要步骤。细胞计数和细胞活力信息可用于监测增殖率、优化生长条件和归一化细胞数据以供进一步研究。

为获得最佳结果,准确且可重现的细胞计数和细胞活力测量至关重要。测量细胞计数和细胞活力的传统方法通常通量低,缺乏线性,并且操作过程耗时,无法提供满足活细胞分析重现性和准确度所需的足够的事件采样。

iQue® 细胞计数和活力分析试剂盒可在 96 孔和 384 孔板中在宽线性范围内获得高准确度,并通过从细胞标记到分析的简化工作流程(无需细胞稀释),对来自各种非贴壁细胞系的绝对细胞计数和活力数据进行可重现的分析。利用 iQue® 高通量流式细胞仪高效准确地定量细胞计数和细胞活力。


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检测原理

iQue® 细胞计数和活力分析试剂盒检测原理

该测定试剂盒专为定量分析细胞计数和细胞活力而设计,其经过优化,可在采用 BR 和 VBR 配置的 iQue® 平台上运行,并且与高通量采样和流式细胞仪检测功能相结合。其利用从细胞标记到分析的简化的工作流程,能够在宽线性范围内对各种非贴壁细胞系的绝对细胞计数和细胞活力进行快速分析。

该试剂盒中包含经验证的试剂和预置模板,用于设门策略和分析。其使用客户提供的细胞,在快速、无需洗涤的分析中鉴别活细胞并测定样品密度。

基本的分析工作流程:

  • 将未稀释的细胞与细胞活力染料以 1:1 的比例混合并孵育 10-30 分钟
  • 将计数微珠加入孔中
  • 在 iQue® 平台(采用 BR 和 VBR 配置)上对样品板进行分析

关键优势

提高生物学工作流程的准确度和重现性

通过对细胞计数和细胞活力的多重评估,确保获得稳定的实验结果



图 1.在较宽范围内进行可重现和准确的细胞活力评估和细胞计数

(A) 对各种比率的生长细胞与热灭活细胞(Jurkat、Raji 或 Ramos 细胞系)的混合物进行测试,以确保整个灵敏度范围内的线性相关性。

(B) 比较不同密度的 Jurkat 细胞以确定细胞计数的线性范围。可靠地测量密度范围为 8 × 104 个细胞/mL 至 2 × 107 个细胞/mL 的未稀释的细胞。

实现高通量分析

在 96 或 384 孔板中,在宽线性范围内高效定量测定细胞活力和细胞计数

图 2.利用热图和透视图得到可操作的数据

通过将有限稀释的 CHO-S 细胞接种到 96 孔板中来进行有限稀释克隆。将细胞置于定轨摇床上,在 37 ℃ 和 5% 湿度下培养。外孔仅含培养基,以免产生边缘效应。使用 iQue® 细胞计数和活力分析试剂盒测定细胞密度和细胞活力。生成 Profile Map,以突出显示满足多项标准 [(细胞密度 > 30 万个细胞/mL)且(细胞活力 > 75%)] 的孔。可通过拖动图表顶部的滑块或右键单击编辑来调整 Profile Map 中的各项指标,“匹配”图将自动更新。匹配结果可导出为 CSV 文件,用于选择匹配结果或其他下游分析。

(A) 细胞密度热图

(B) 细胞活力热图

(C) 显示与较高密度和活力结果匹配的 Profile Map

节省宝贵的样品

样品量需求少 (10 µL),从而为更关键的下游分析节省宝贵的样品。

图 3. 小体积(10 µL/样品)方案可节省细胞并缩短设置时间。

最大程度地提高分析效率

简化的工作流程,采用快速、简单的方案,无需进行细胞清洗和稀释


图 4.模板化圈门和分析

将提供的带有预设圈门、采集设置和分析的模板导入 iQue® ForeCyte® 软件,实现对细胞计数和细胞活力的定量。

订购信息

订购信息

平台:与 iQue® 3/iQue® Screener Plus - VBR 和 BR 配置兼容

iQue® 细胞计数和活力分析试剂盒

1 × 96 孔

BA-97110

5 × 96 孔

BA-97111

1 × 384 孔   

BA-97112

5 × 384 孔    

BA-97113


资源

iQue® 细胞计数和活力分析试剂盒产品指南

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