全自动血浆单B细胞分泌物筛选及分离回收

加速抗体发现:8 小时内并行分析和分离数千个血浆单 B 细胞

理想克隆是指可分泌大量目标抗体的克隆,其识别和筛选是抗体发现流程中关键且耗时的步骤之一。

赛多利斯的 CellCelector 全自动无损细胞分离系统通过与特有的纳米孔技术相结合,通过单一平台即可将细胞筛选、成像和灵敏度优良的单细胞检测和分离流程贯彻执行。单细胞分析可检测具有独特性质的罕见抗体,这是传统筛选方法所无法企及之处。用户可以在多项检测参数中迅速锁定并回收单个细胞(无需花费数周进行培养),大幅减少检测的细胞用量。

只需一天:CellCelector 精简的单 B 细胞筛选和分离工作流程

第 1 步:细胞接种易如反掌

在纳米孔板中手动接种单细胞悬液。CellCelector 成像模块及软件将自动对孔底部每一个纳米孔逐孔扫描及表征。根据板类型和纳米孔尺寸及形状的不同,结果在 60,000-200,000 纳米孔/孔之间。加入单细胞悬液后,单个细胞根据泊松分布随机进入纳米孔中。

图 1:H 100 型纳米孔:正六边形 100 µm 纳米孔,接种 B 细胞和特异性抗原包被微球

第 2 步:单细胞筛选

使用 CellCelector 在明场中扫描接种孔。软件自动识别单细胞纳米孔

第 3 步:运行单细胞分泌试验

使用特异性抗原包被的孔板进行检测

纳米孔阵列的表面涂有抗原,并在血浆 B 细胞接种前用 BSA 溶液封闭。

在纳米孔中对单个细胞进行分泌物测定,以便快速识别感兴趣的分泌细胞。CellCelector B 细胞工作流程支持多种类型的细胞检测。

图 3a: 使用特异性抗原包被孔板进行测定。纳米孔阵列的表面涂有抗原,并在血浆 B 细胞接种前用 BSA 溶液封闭。

抗原表达报告细胞测定

将血浆 B 细胞与表达特定抗原的报告细胞一起接种。

图 3b: 抗原表达报告细胞测定

基于微球的抗原特异性测定

将血浆 B 细胞与抗原特异性包被的微球一起接种。

图 3c: 基于微球的检测
   

其他检测:

  • 受体/配体阻断检测
  • 细胞表面标志物检测
  • 多重分泌检测
  • 功能检测(例如表达 GFP 的细胞)

第 4 步:细胞转移

识别出所需的细胞(匹配细胞)后,CellCelector 可以将它们转移到适当的目标容器中进行后续分析和处理。CellCelector 采取独特的压力控制式自动抽吸方式,有助于温和地进行挑取,从而保持更高的挑取 B 细胞存活率。

第 5 步:生成报告


从单细胞筛选到匹配细胞的转移的整个过程都有完整记录,并且符合 GLP 和 GMP 标准。分离转移细胞的过程均记录有高质量显微图像供日后审查。所有成像和数值数据(例如细胞形态和荧光值)以及每个细胞的源位置和目标位置都存储在数据库中,并且可以快速轻松地导出到客户的 LIM 系统中。

CellCelector 用于血浆单 B 细胞工作流程的优势

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自动

纳米孔技术可在一块纳米孔板中筛选多达 500 万个 B 细胞或杂交瘤 – 并且用时不超过 8 小时

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精确

单个 B 细胞的抗原特异性鉴定和分离

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兼容

使用包被板、微球或报告细胞来捕获感兴趣的抗体

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灵活

单次运行可多重筛选多达 14 种抗原

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高效

多种细胞类型的并行高通量相互作用研究

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用于抗体发现的全自动基于图像的筛选和分离克隆及单细胞。

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