在单细胞水平破译循环肿瘤细胞异质性
循环肿瘤细胞 (CTCs)是从肿瘤中脱落并进入血液循环的细胞。这些细胞在继发部位微环境适应和定植后会形成转移灶，导致超过 90% 的肿瘤相关死亡。通过简单抽血获得的 CTC 可以作为“液体活检”实时监测肿瘤特征，包括肿瘤间和肿瘤内异质性。然而，由于少量 CTC 细胞和大量白细胞和红细胞的数量悬殊，CTC 分离和后续表征在技术上具有挑战性。研究人员们已经开发了用于 CTC 检测、富集和分离的多种分析方法。这些方法都利用了 CTC 特异性特性，如表面标志物或例如尺寸、密度或变形性。
赛多利斯为您提供一套独特的完整解决方案，用于在富集和染色步骤后，进行CTC检测并分离。您可以将分离细胞用于 DNA、RNA 或蛋白质组分析。该解决方案以 CellCelector 系统为核心，使用专门开发的耗材（例如 CellCelector 纳米孔阵列、MagnetPick 载玻片）和经验证的方案。
使用 CellCelector 的单细胞 CTC 分离和分析工作流程
在典型 CTC 分离和分析工作流程中应用 CellCelector。*红细胞 (RBC) 裂解是可选的，取决于使用的富集技术；**某些富集技术允许富集后原位染色；在其他情况下，应在从富集装置中取出样本后进行染色。
与现有富集技术完全兼容
如许多出版物所述，CellCelector 平台与多种上游富集技术兼容：
阳性免疫磁珠富集法（基于EpCAM表面标志物等）： 例如CellSearch®, Isoflux™, MagSweeper™
基于CD45表面标志物的白细胞（WBC）阴性消除方式：例如Dynabeads™, RosetteSep™
基于微流体或过滤器的非标记分离：例如Parsortix™, Clearbridge™, Vortex™, ScreenCell™, RareCells™, Circulogix™ etc.
CellCelector 工作流程和耗材可以处理多达几十万个血细胞的单份样本，无需减少样本量。
富集技术 | 参考文献 |
|---|---|
阳性免疫磁珠 | |
CellSearch® (EpCAM) | Neumann et al., 2016 |
Isoflux™ (EpCAM) | Ma et al., 2016; Cabezas-Camarero et al., 2019; Nimir et al., 2019; Ding et al., 2019 |
MagSweeper™ (EpCAM) | Lohr et al., 2014 |
Dynabeads 和手持磁珠 (rVAR2) | Agerbæk et al., 2018; Bang-Christensen et al., 2019 |
CD45 阴性耗竭 | |
Dynabeads® CD45/Dynal® MPC®-S | Blassl et al., 2016 |
RosetteSep™ Human CD45 | Yao et al., 2014 |
基于尺寸的分离 | |
Parsortix™ | Lampignano et al., 2017; Szczerba et al., 2019; Gkountela et al., 2019; Reinhardt et al., 2019; Donato et al., 2019 |
密度梯度离心 | |
OncoQuick™ | Heidary et al., 2014 |
在 CellCelector 单细胞分离步骤前使用的 CTC 富集技术和相应的已发表论文（可在“参考文献”页面查找参考文献全文）。
各种癌症类型的 CTC 分离
癌症类型 | 参考文献 |
|---|---|
乳腺癌 | Heidary et al., 2014; Schneck et al., 2015; Neumann et al., 2016; Lampignano et al., 2017; Szczerba et al., 2019; Gkountela et al., 2019; Reinhardt et al., 2019; Sprouse et al., 2019 |
前列腺癌 | Lohr et al., 2014; Ma et al., 2016; Nimir et al., 2019 |
结直肠癌 | Adalsteinsson et al., 2013; Cabezas-Camarero et al., 2019 |
胰腺癌 | Kim et al., 2019 |
卵巢癌 | Blassl et al., 2016 |
肺癌 | Yao et al., 2014; Ding et al., 2019 |
脑癌 | Agerbæk et al., 2018; Bang-Christensen et al., 2019 |
黑色素瘤 | Sprouse et al., 2019 |
CellCelector 技术能够从各种癌症类型的液体活检样本中分离得到纯的单个肿瘤细胞。全球已有多家前沿癌症研究中心使用 CellCelector 系统致力于众多癌症实体和应用领域的发展。
使用 CellCelector 平台分离 CTC 的优势
值得信赖
- 极低的细胞损失（无死体积）
- 单细胞挑取效率可达几乎 100%（取决于工作流程）
- 自动挑取控制（挑取成功/失败）
快速
- 可以在 10 分钟内挑取 20 个单个 CTC，与 RNA 分析和活细胞挑取兼容
- 每份样本的 CTC 计数和蛋白细胞分离大约需要 1 小时（使用已富集且已染色的样本）
易于操作
- 无需复杂的样品制备
- 功能强大的用户友好型软件
功能多样
- 分离单个 CTC 和细胞群
- 分离固定细胞和活细胞
- 与各种上游富集方法直接兼容
- 基于细胞形态、病理染色和/或多达 6 个荧光标记的自动化 CTC 检测
- 自动、半自动或手动细胞选择以进行挑取
- 挑取单细胞或细胞池
- 与大多数实验室器具兼容：孔板、 培养皿、显微镜载玻片、PCR 板/管、纳米孔阵列、定制耗材等。
与各种下游分析和培养工作流程完全兼容
- 与包括 NGS、RNAseq 等在内的多种单细胞分子分析方法兼容。
低量抽吸和分配样本，与所有单细胞 WGA 和 qRT-PCR 试剂盒无缝兼容
- 目的位置温度受控 (4～37 ℃)，有效防止 RNA 降解或促进活细胞存活
- 以低剪切力进行快速挑取，利于活细胞扩增
