获取精确数量细胞以进行验证实验

图 1.CellCelector支持分离转移细胞到任何标准或定制孔板、管或小瓶中。

通过 CellCelector 平台分离精确数量细胞包括以下几个步骤：(i) 在 CellCelector S200 ULA 纳米孔板 中接种细胞，细胞密度与每个纳米孔的目标细胞数相对应；(ii) 对纳米孔中的细胞进行自动扫描并计数；(iii) 自动选择填充目标细胞数量的纳米孔；(iv) 操作人员验证列表；(v) 自动将选定的细胞组转移到目标管/孔中，并完整跟踪整个过程（图 2）。

图 2. CellCelector 自动分离精确数量细胞的工作流程。

当将单细胞悬液接种到纳米孔板中时，平台将随机捕获纳米孔中的细胞。理想情况下，单细胞悬浮液均匀播种会遵循标准泊松分布。我们在此处通过一个方程式来描述随机捕获纳米孔中给定数量细胞 (k) 的概率 (p)，其中 λ 是每个纳米孔的平均接种细胞数量。图 3 显示了几种细胞接种密度下 S200 24 孔纳米孔板的单个孔中的理论和实测细胞分布。可以通过此方法计算接种到 24 孔板每个孔中所需的细胞数量，以便最大限度地提高在纳米孔内捕获所需数量细胞的概率。

图 3. 接种细胞密度为 1、5、10 和 20 个细胞/纳米孔时的理论（线）和实验（点）泊松分布。共计扫描和分析纳米孔 2,500 个。

一旦操作人员验证了要回收的纳米孔列表，系统就会自动对所有选中的纳米孔进行挑取。在挑取过程中，系统会在挑取前后自动保存图像，以便进行质量控制。该系统还可以将几个纳米孔的内容物汇集到一个目标管中，从而使更多细胞沉积，例如 20 个细胞 = 2 个纳米孔x 10 个细胞，100 个细胞 = 5 个纳米孔x 20 个细胞。

图 7. 挑取一组 20 个细胞的示例。自动保存挑取前后的图像。

被挑取的细胞100%沉积到目的孔中。如果将细胞转移到平底板或管中，可以使用 CellCelector 软件轻松地观察沉积的细胞并计数（图 8）。

图 8.检测沉积在光学平底 PCR 管中的 20 个细胞。