使用 CellCelector 自动分离单个精子细胞
单个精子细胞分离对于通过遗传指纹分析来鉴定家庭关系问题、在法医学中揭露性犯罪以及完成体外受精过程都至关重要。
我们将在此处简单介绍如何使用 CellCelector 全自动无损细胞分离系统分离单个精子细胞。
CellCelector将高精度机械挑取手臂与高内涵倒置显微镜独特结合，可以实现自动化细胞分析，并利用玻璃毛细管分离单个精子细胞。您可以通过 CellCelector 系统将耗时的手动操作转换为标准的自动化程序。
使用 20x 物镜在明场下观察并分离单个精子细胞。
使用一些用于在显微镜下测量细胞特性的软件功能，在约 5 x 33 µm 处测定精子细胞的大小。
为便于查看，在矩形标记区域中显示了放大的图片（右下角）。
单个精子细胞的检测
单个精子细胞的检测可以在手动模式下通过鼠标点击实时图像屏幕来完成，也可以在样本扫描后使用一组经过调整的检测参数（直径、面积、延伸率等）自动进行检测。
通过定义一系列灰度值可以完成基本检测。目标细胞可以从邻近细胞和背景中分离出来。根据灰度值阈值的设置方式，可以检测完整单个精子或仅检测精子细胞的头部。
建立自动检测单个人类精子细胞的参数。
通过调整灰度值的范围（A 和 B），可以根据参考图像 (C) 检测精子的不同部分，检测区域用绿色标记（D 和 E）。综合考虑直径、面积、延伸率 (F) 等附加参数，可以更好地改善扫描结果（G 和 H）。
单个精子细胞的分离
使用内径为 30 µm 的单细胞挑取用玻璃毛细管分离单个精子细胞。通过使用体积为60 nL的液体在细胞正上方形成抽吸压力，使细胞脱离底部，并将其与液体一起吸入玻璃毛细管中。将分离得到的精子细胞转移至 2 x 9 孔 Ibidi 载玻片上各个独立的孔中。自动记录每个单细胞分离的挑取前后的图像，并将这些图像保存在数据库中。
在分离单个精子细胞之前（左）和之后（右）拍摄的显微图像。