HSC 子细胞分裂

HSC子细胞分离或“双细胞分离”

造血干细胞 (HSC) 在造血系统中占据顶端地位,负责建立和维持功能性血液系统。HSC 凭借其可自我更新以及可生成各种造血系统血细胞的特性发挥其独特的作用。因此,自我更新和分化的平衡对于我们血液系统的健康功能而言至关重要。

然而,导致一种或另一种干细胞命运的动力学还尚未明确。CFC实验是研究命运决策的备选方法之一(请参考 造血干细胞集落)。然而,CFC 试验只能研究单个干细胞或祖细胞的集落形成,无法区分这些集落内的单细胞。因此,研究细胞命运决策的另一个选择是在分子和功能试验如单细胞测序或移植试验中,在单细胞水平上研究源于一个“母”HSC 的“子”细胞。

然而,这些方法都需要先分离单个“子”细胞(此处也称为“Doublets 分裂”)。尤其是对于功能和表达实验,必须在对细胞分子程序影响尽量小的条件下进行造血干细胞分裂。通常通过 FACS 从骨髓或血液样本中分离 HSC细胞。然而,由于总体细胞数量较少(最多 2 个子细胞),无法通过此方法进行 Doublets 分裂。过去,研究人员通过连续稀释来进行 Doublets 分裂,即将细胞从一个孔移液到另一个孔,直到得到单个细胞。然而,这种方法并不温和,损伤风险高,甚至可能导致细胞松散。此外,双细胞“难分难舍”的特性导致连续稀释法的成功率较低。

我们现在为您提供一个更好的选择,使您能够温和地分离子细胞并且确保每个单细胞可追溯。您可以使用 CellCelector 的交互式挑取模式来分裂双细胞,同时可以通过实时图像全面掌握细胞行为,避免丢失细胞。而且,CellCelector 挑取细胞的方式非常温和,最大限度地减少了对细胞分子程序的影响。不仅如此,CellCelector 还可以严格记录挑取流程,确保充分可追溯。

A:来自同一个 HSC 的子细胞,红色箭头指向的是待分离的细胞。

B:将毛细管置于待挑取细胞(红色箭头)旁边的位置以分裂双细胞,尽量远离其他细胞。

C:在毛细管的吸引力下,细胞现在开始向毛细管方向移动,最接近毛细管的细胞移动最快(红色箭头)。

D:一旦细胞无法逃逸,将毛细管移至远离其他细胞的位置。

E:最终,被吸引的细胞与其他子细胞之间的距离变得足够大,此时可以安全地进行单细胞挑取。

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