应用指南:如何移取 PCR 预混液从而提高 qPCR 结果的准确度

聚合酶链式反应 (PCR) 检测的灵敏度高,这一点是在科学实验室 — 特别是在从事临床诊断和生物制药的实验室中得以成功广泛应用的重要原因之一。然而,移液技术等因素会影响 PCR 检测结果。
 

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常见问题解答

  • 移液操作对 qPCR 结果有什么影响?  - PCR 预混液中含有蛋白质,不当的移液操作可能会在样品中产生气泡,这可能会使实验结果偏离预期。
  • 在使用 PCR 预混液时,哪种移液技术最适用?- 根据 ISO 指南,建议将移液器吸头预先润湿 3 到 5 次,同时建议使用反向移液技术,因为 PCR 预混液具有粘性。
  • 在使用 PCR 预混液时,移液器的校准重要吗?- 处理 PCR 预混液等粘性材料时无法避免出现误差。因此,尽可能多地消除风险因素很重要。确保移液器定期维护和校准是保持结果准确和重现性的有效方法。
  • 在准备 qPCR 检测时,我应该使用多道移液器吗?- 在 qPCR 检测中使用多道移液器可以确保均匀并快速地将等量 PCR 预混液分配到多个孔中。这在使用 96 孔板或 384 孔板时尤其节省时间。使用电动移液器和多次分液模式可以进一步提高实验的重现性。

PCR 预混液通常在 qPCR 准备过程中使用,但准确移液可能存在一定的难度。有关 PCR 预混液良好移液操作的详细信息,请下载此应用指南,并了解以下内容:

  • 移取粘性液体的指南
  • 使用电动移液器的优势
  • 应用正向和反向移液技术获取理想结果
  • 适用于 qPCR 准备的合适移液器吸头

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