对 Bioparticles® 的吞噬作用 - Incucyte® 吞噬作用分析

什么是吞噬作用?

吞噬作用是一种特殊形式的内吞作用,细胞以这种方式吞噬和内化固体物质。巨噬细胞、中性粒细胞和未成熟的树突状细胞是免疫系统的主要吞噬细胞,专门参与吞噬过程。吞噬作用是控制、杀伤和处理微生物以进行抗原呈递的重要机制,代表了病原体先天免疫应答的一个重要方面。

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应用

Incucyte® 吞噬作用分析简介

简单的即混即读式成像分析,可直接在培养箱内对活细胞的吞噬作用进行实时自动定量分析。该分析采用 pH 敏感性偶联探针,可对生物颗粒的内化进行实时的可视化和分析,非常适用于监测免疫细胞对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌或酵母源性病原体的吞噬作用。


视频:使用 Incucyte® 活细胞分析系统实时监测吞噬作用。使用 Incucyte® 活细胞成像和分析系统采集的延时视频实时显示了小鼠 J774A.1 型巨噬细胞吞噬 Incucyte® pHrodo® 绿色大肠杆菌 Bioparticles® 的过程。pHrodo® Bioparticles® 在被吞噬并进入吞噬体的酸性环境中后,荧光增加。Incucyte® 集成图像分析工具能够在整个分析过程中分析和测定绿色荧光信号,并将背景荧光的影响降至最低。注意巨噬细胞的动态活动,和随着时间推移形成吞噬杯,进行生物颗粒吞噬的过程。

Incucyte - Empower Live-Cell Analysis Inside Your Incubator

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应用指南

将活细胞分析和流式细胞仪结合到单一工作流程中,深入了解免疫细胞的杀伤机理。

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检测原理

  • 将巨噬细胞(例如 J774A.1 小鼠巨噬细胞)或其他吞噬细胞接种到 96 或 384 孔板中。
  • 添加即混即读的无菌 Incucyte® pHrodo® Bioparticles® 实时监测吞噬作用。
  • 细胞荧光增加表明 pHrodo® Bioparticles® 已内化至吞噬体中。Incucyte® 自动图像分析可实现对随时间变化的吞噬作用进行定量分析。

关键优势

Incucyte® 吞噬作用分析的关键优势

使用延时成像技术验证吞噬作用

图 1. J774A.1 小鼠巨噬细胞吞噬 Incucyte® pHrodo® 绿色大肠杆菌 Bioparticles® 的 4 小时延时可视化视频。图像中证明了细胞质中存在荧光点状(吞噬体)标记的结构,但细胞核中不存在该结构。

自动分析和定量

图 2. 使用荧光分割进行吞噬作用的定量分析。Incucyte® 软件能够准确分割荧光图像(桃红色 mask),并将背景荧光的影响降至最低。

即混即读的 96/384 孔规格 - 无需执行细胞固定、封闭或分离操作

图 3. Incucyte® 吞噬作用分析快速入门指南。

查看通用方案

高灵敏度、低背景、低细胞数

响应程度取决于细胞数量和 Bioparticles® 数量。

图 4. 吞噬作用的定量取决于细胞数量和 Bioparticles®J774A.1 小鼠巨噬细胞吞噬 Incucyte® pHrodo® 绿色金黄葡萄球菌 Bioparticles®(96 孔规格)。注意每孔低至 3 K 细胞时的高信噪比。

图 5. 在没有细胞、Bioparticles® 或抑制剂(细胞松弛素 D)的情况下,产生高度一致的吞噬信号,且几乎没有背景信号。图中显示了 J774A.1 细胞吞噬 Incucyte® pHrodo® 绿色大肠杆菌 Bioparticles® 的时程孔板视图。

图 6.细胞松弛素 D、拉春库林 A、诺考达唑抑制吞噬作用。图中显示了 J774A.1 小鼠巨噬细胞在添加抑制剂的情况下吞噬 Incucyte® pHrodo® 绿色大肠杆菌 Bioparticles® 的结果。

Incucyte® 吞噬作用分析 vs. 其他常见方法

评估吞噬作用的常用方法通常为单点分析(例如高内涵分析 (HCA)),需要细胞分离(例如流式细胞仪)或清洗/淬灭标记病原体(例如荧光素标记)。

Incucyte® 活细胞分析

酶标仪

流式细胞仪   

HCA

ELISA

实时细胞可视化

 

集成分析

 

 

 

即混即读,无需清洗或淬灭操作 

 

长期动力学测定

 

灵活选择效应细胞  

 

 

 

 

 

无需细胞固定/分离

 

 

高灵敏度/低背景信号

 

 

 

低细胞数/生物颗粒数量    

 

 

 


订购信息

订购信息

Incucyte® pHrodo® Bioparticles® 经充分验证,可用于 Incucyte® 活细胞分析系统,并经过灭菌处理,可进行吞噬作用的长期监测(0 至 >48 小时)。


产品

产品数据表

安全性数据表     

数量

产品目录号

Incucyte® pHrodo® 红色大肠杆菌 Bioparticles®

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2 mg

4615

Incucyte® pHrodo® 绿色大肠杆菌 Bioparticles®

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2 mg

4616

Incucyte® pHrodo® 红色酵母聚糖 Bioparticles®

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1 mg

4617

Incucyte® pHrodo® 绿色酵母聚糖 Bioparticles®

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1 mg

4618

Incucyte® pHrodo® 红色金黄葡萄球菌 Bioparticles®

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2 mg

4619

Incucyte® pHrodo® 绿色金黄葡萄球菌 Bioparticles®

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2 mg

4620


资源

文献和文档

产品手册:用于免疫学研究的 Incucyte® 分析

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Bioparticles® 吞噬作用的常见问题解答

查看常见问题解答

方案:Incucyte® pHrodo® Bioparticles 吞噬作用分析

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Researchers at The University of Oxford use Incucyte® live-cell analysis system to quantify phagocytosis with 牛津大学的研究人员使用 Incucyte® 活细胞分析系统定量分析吞噬作用,实现了比现有方法更高的准确度和灵敏度。即使细胞数量稀少或有限,Incucyte® 也能够支持原代吞噬细胞的详细体外研究。Kapellos TS, Taylor L, Lee H, Cowley SA, James WS, Iqbal AJ, Greaves DR doi: 10.1016/j.bcp.2016.07.011

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