移液建议
大多数基本实验室指南都记载了关于移液器和移液技术的内容。事实上,移液是实验室环境中最常见的任务之一,也是最重要的任务之一。
重要的是要记住,移液操作并没有“标准答案”。从液体到工作流程的一切都可能直接影响移液器、配件和移液技术的选择。
了解应用的具体需求可以帮助您选择正确的工具并改善结果。以下简单介绍了工作中的常见应用及相应的推荐移液设备。
移液应用
细胞分析
细胞有时非常敏感,因此需要在实验室中仔细呵护。匆忙和粗糙的处理可能对它们有影响,而另一方面,长时间脱离培养箱条件又可能会阻碍它们的生长。因此我们需要在进行样品制备时考虑到方方面面,包括用于处理细胞以进行细胞分析等研究的仪器和方法。
在处理基于细胞的系统时,良好的移液技术对于实现细胞接种中细胞的均匀分布和避免起泡和气泡形成至关重要。使用适当的移液工具和良好的移液技术可以减少批间差异,提高结果的可靠性。
电动移液器有望实现移液器步骤标准化,包括轻柔混合和避免吹空。Picus 不必反复上下移液吹打混合,可以在不干扰细胞的稳定速度下进行混合。多通道移液器可缩短细胞离开培养箱的时间或样品制备时间。
将您的移液器与 Safetyspace® 滤芯吸头匹配,该吸头可以容纳所有移液模式下的全部移液量,避免在吸液过程中意外发生液体接触到滤器的情况。
我们建议使用 Picus® Nxt 10 µL 来转移样品(产品编号:LH-745021),使用 Picus® Nxt 300 µL(产品编号:LH-745061)做样品制备。Picus® Nxt 1,200 µL 8 或 12 通道电动多通道移液器适用于在多孔板上接种或送进细胞(产品编号:LH-745391、LH-745491)。
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细胞培养工作
细胞培养物很容易受到例如支原体的污染,而且污染的传播会为整个实验室的功能带来风险。细胞对非最佳条件也很敏感,应尽量减少其离开培养箱的时间。
Tacta 移液器易于清洁,可整支高压灭菌,有助于防止细胞培养工作中的污染。将 Tacta 与 Safetyspace® 滤器吸头组合使用可将交叉污染风险降至最低。在使用多孔板培养细胞时,为了减少离开培养箱的时间,应选择多通道移液器。
聚合酶链式反应(PCR,qPCR)
通过聚合酶链反应 (PCR) 进行核酸扩增已用于许多领域的定量、检测和分离,是一种常见的诊断方法。其中包括使用热稳定的 DNA 聚合酶进行 DNA 扩增以用于下游分析,或者可以与荧光染料或探针偶联以进行实时定量(qPCR 或实时 PCR)。在所谓的逆转录酶 PCR (RT-PCR) 中,通过与逆转录酶步骤偶联,也可用于研究 RNA。
qPCR 通常以 96 或 384 形式在反应板或反应管中进行,反应体积范围为 10-50 µL。实验制备从混合反应溶液开始,即使用酶和反应缓冲液制备所谓的预混液,将预混液分液至反应容器中,然后加入样品和对照品。因此,PCR 实验的移液工作量庞大,并且最好使用多通道移液器分液预混液。用电动移液器多次分液预混液和重复样品有助于节省实验设置时间。
在 PCR 中,交叉污染的预防尤其重要,通常采取滤芯吸头以减少气溶胶传播。
由于移液容量较小,并且 PCR 试剂和酶溶液通常含有甘油,因此可以采取反向移液技术以准确和精确地分液。Safetyspace® 滤芯吸头可容纳反向移液的全部移液容量。
使用 Picus® 0.2-10 µL 单通道或多通道移液器分液样品(产品编号:735021、735321、735421),
Picus® 5-120 µL 单通道或多通道移液器分液样品或预混液(产品编号:735041、735341、735441)
Picus® 10-300 µL 单通道或多通道移液器分液预混液(产品编号:735061、735361、735461),Picus® 50-1,000 µL 制备预混液(产品编号:735081)。为移液器选择相应容量的匹配 Safetyspace® 滤芯吸头,当利用多通道移液器时,您将需要试剂槽(产品编号:783500)
化学品
在化学工业的实验室工作中,当仪器受到化学品的侵蚀时往往难以持续获得可靠的结果。
此时应选择可产生可靠结果且易于保持清洁的仪器,例如耐化学腐蚀的瓶口分液器和 Proline® Plus 移液器。
瓶支架可以避免瓶倾倒和化学品溢出所造成的麻烦。
耐化学腐蚀的 Optifit 吸头与 Proline® Plus 结合使用可以确保准确的结果。Optifit 吸头由纯聚丙烯制成,不会引入鬼峰或浸出物,可以用于最灵敏的分析。
ELISA 方法
酶联免疫吸附测定 (ELISA) 用于检测和定量蛋白质、核酸等可溶性生物分子。ELISA 依赖于特异性抗体-抗原相互作用,该免疫分析广泛应用于免疫学、微生物学和药理学等领域。ELISA 在临床实验室中也很常见。将 ELISA 用于定量时,需要通过连续稀释步骤制备标准品溶液。这种情况下,通常也需要将样品稀释到标准品的浓度范围内。
多通道 Tacta®,尤其是 Picus® 移液器非常实用,在用于填充多孔板时可以节省时间。Picus® 可以将常见设置保存到内存中,易于优化和标准化样品制备。将 Tacta® 和 Picus® 移液器与配套的 Optifit 吸头搭配使用即可获得可重现的结果。