图 1. 追踪与 T 细胞活化相关联的细胞参数的变化。基于活化 T 细胞的细胞增大和形态变化进行亚群分类。 将 PBMC 用抗 CD3 和 IL-2 或溶媒对照进行处理，并用 Incucyte^® S3 监测随时间的变化。  (A-D) 活化诱导平均细胞面积和离心率（所有细胞）发生时间依赖性增加。  注意离心率的变化先于面积的增加。  Cell-by-Cell 面积分布 (E) 和密度图 (F-H) 突出显示了活化后异质性随时间的增加，以及具有高离心率的大细胞群的出现。显示的值为 12 个孔的平均值 ± SEM。

图 2. 分析活化 T 细胞亚群：CD71 上调。(A-C) Cell-by-Cell 密度图显示 CD71（经 FabFluor-488 标记）荧光在活化 T 细胞中随时间和细胞面积（相）的增加而增加。  (D) 活化后 CD71+ 细胞（而非 CD4+ 细胞）比例的动态变化。(E) 亚群分析显示，与小细胞 (< 110 mm2) 相比，大细胞 (> 100 mm2) 中的 CD71 表达优先上调。这些数据证明 CD71 表达发生活化诱导的时间依赖性增加，并且细胞大小与 CD71 之间存在强关联，在活化 4 天后，> 90% 的大细胞表达 CD71。

图 3. 在 Incucyte^® S3 上，通过细胞鉴别和分类进行免疫表型验证。使用流式细胞术或使用 FabFluor-488 标记抗体的活细胞免疫细胞化学分析，对来自 3 例供体的新鲜分离的 PBMC 中的六种 CD 标志物和 IgG 对照进行表征。  考虑到来自 3 例供体的平均值 (A) 或单独供体的各个值 (B)，在两种方法之间观察到强相关性。

图 4. 在 Incucyte^® S3 上使用 Cell by Cell 分析对各种细胞类型中的 HER2 表达进行表型分析。使用 FabFluor-488 标记抗体对 A549、SKOV-3 或 SkBr3 细胞的 HER2 表达进行表征。图像（顶行）和荧光定量（底行）表明，A549 细胞中缺乏 HER2 表达，SKOV-3 细胞中发生异质性表达，SkBr3 细胞中则发生均一的高水平表达。同型对照响应代表阴性细胞群。

图 5. 生成适用于药理学研究的稳定的细胞周期阶段数据。在顺铂或 5-氟尿嘧啶 (5FU) 处理后，对表达 Incucyte^® 细胞周期红色/绿色慢病毒试剂 (INSERT LINK) 的 HT1080 纤维肉瘤细胞中的细胞周期阶段分布进行定量。第 24 h 时的响应显示于细胞图像中（轮廓示出由 Incucyte^® Cell-by-Cell 分析软件鉴别出的单个细胞）(A)。经顺铂处理后，处于 G1 期（绿色荧光）的细胞百分比以浓度和时间依赖性方式降低 (B)，处于 S/G2/M 期（红色荧光）的细胞百分比则以浓度和时间依赖性方式增加 (C)，与其已知的干扰有丝分裂的作用机制一致。经 5FU 处理后，处于 G1 期的细胞百分比增加 (E)，处于 S/G2/M 期的细胞百分比降低 (F)，与 5FU 对 DNA 合成的已知影响一致。浓度响应曲线（D 和 G）显示出第 24 h 时化合物对细胞周期的所有可检测阶段的影响。

图 6. 追踪细胞亚群中的细胞健康：经喜树碱（CPT，细胞毒性化合物）或环己酰胺（CHX，细胞抑制化合物）处理后，HT1080 纤维肉瘤细胞凋亡的时程。利用 Incucyte^® Nuclight 红色试剂（细胞核活力标记物）和无干扰 Incucyte^® Caspase 3/7 绿色试剂（细胞凋亡指示剂）的多重读数确定细胞健康状况。细胞图像显示出第 24 h 时的响应，并带有相关的分类遮蔽（A 和 E）。使用 Incucyte^® Cell-by-Cell 分析软件工具，基于红色和绿色荧光对细胞亚群进行分类（B 和 F）。经 CPT 处理后，红色细胞群减少，指示活细胞损失；红色和绿色荧光增加，指示早期凋亡；且绿色荧光增加，指示晚期凋亡 (C)。经 CHX 处理后，未发生细胞凋亡 (G)。显示了早期凋亡细胞群的浓度响应时程（全部细胞中表现出红色和绿色荧光的细胞百分比，D 和 H）。显示的值为 3 个孔的平均值 ± SEM。