使用高通量流式细胞技术和活细胞分析技术表征和优化诱导多能干细胞培养

阅读时长: 13分钟 | 作者: Daryl Cole, Kirsty McBain, Nina Senutovitch, Nicola Bevan, Clare Szybut

iPSCs 是许多研究和临床开发领域的宝贵资源,如药物开发、癌症研究、组织类器官模型建立以及神经生物学研究等。此外,iPSC 在转化医学领域的应用日趋增多。

iPSCs 需要高度特定的最佳生长条件来维持多能性、生存力和增殖潜力。这些要求常昂贵,并且培养方法可能属于时间密集型,因而需要复杂的技术。

iPSCs 的长期培养可能会形成基因型和表型异质性,即使在单一细胞来源的细胞系中也是如此;因此,必须开发能够实时监测分析,并减少iPSC 细胞系异质性的方法。

该应用说明描述了一种高效且便捷的组合方法以进行iPSCs 表征、维护、放大和筛选。通过Incucyte® 实时活细胞分析系统进行实时、可视化的形态学分析,并使用iQue® 高通量流式细胞仪,通过消耗少量样品(10 μL)进行快速表征。


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主要内容

本应用说明着重介绍的关键工作流程优势包括:

  • 精简工艺和数据分析可节省时间和试剂成本,从而减少低质量细胞产品造成的损耗
  • “微量化”实验可降低抗体试剂成本,并节省用于下游扩展、表征和分化的样品
  • 在整个时间过程中监测iPSC 细胞系,从而更深入地了解随时间推移的形态学和多能性变化
  • 快速、免清洗、无需固定的检测方案,灵活检测多能性表面标志物

图 1. 用于iPSC细胞系选择和分化监测的iQue® 和Incucyte® 组合工作流程示意图

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