使用Sartoclear Dynamics® Lab高效澄清AAV粗细胞裂解液
概述
腺相关病毒(AAV)因其非致病性且能够转导各种类型细胞而在基因治疗中起着关键作用。本研究的目的是通过测试不同材质喝孔径 Vivaflow® SU膜包切向流过滤(TFF)的效果,来确定和表征适合 AAV8 浓缩的超滤膜。我们比较了两种膜材质,聚醚砜(PES)和Hydrosart® 再生纤维素(RC),以及三种截留分子量(MWCO),30、100和300kDa。评估了 TFF 性能、AAV8 回收率(基因组拷贝数和衣壳滴度)及总蛋白去除率。结果表明 100kDa Hydrosart® RC 膜的 AAV8 回收率最高,为95%,且检测结果表面透过液中无损失。此外,从截留物中去除了29%的总蛋白。这些结果证明了 100kDa RC 膜对 AAV8 浓缩的性能,并表明其适用于具有相似衣壳大小的其他 AAV 血清型的实验室规模研究和生产。
关键词
- AAV粗细胞裂解物、回收率、工艺效率
- 澄清过滤
- 基因治疗
- 衣壳滴度、基因组滴度
受众
- 研究科学家
- 工艺开发科学家
- 抗体工程科学家
应用
- 膜层析
- 亲和层析
- 抗体纯化