实验室过滤和纯化产品类别
实验室过滤和纯化应用
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诊断研究
测定研究样本中某些蛋白质和疾病标志物在诊断和监测疾病中有着重要作用。各种超滤产品可进行疾病标志物的浓缩，进行进一步分析，这些产品采用了静态、压力或离心驱动地设计。
药物发现
从细胞、细胞碎片和不需要的宿主细胞蛋白以及其他分子中快速分离候选药物，提高生产率，更快地找到最有希望的候选化合物。确保优化地回收候选物，而不影响表征或功能性。我们创新的高质量设备将在澄清、浓缩、纯化和除菌过滤工作流程中提供高分辨率的分离效果。
样品制备
在各种应用中，在分析前去除样品颗粒物和污染分子对于获得准确且精准的结果极为重要。我们的过滤器可用于 HPLC 和分析，有各种认证和可提取物与浸出物数据。有低分子吸附和低死体积膜材质可选，助力进一步提高结果可靠性。
实验室过滤和纯化常见问题解答
实验室过滤是通过引入只有气体/液体可通过的介质，物理或机械地分离样品介质（如液体或气体）中的颗粒或组分。因此，体积排阻会将起始样品分为两部分。一部分（渗透液/滤液）是澄清/过滤的样品，它仅包含足够小、可通过过滤介质的颗粒或分子。第二部分（截留物/浓缩物）是被过滤介质截留的样品材料，此部分通常是固体，因为所有液体样品通过了过滤器。
选择实验室过滤器时请考虑以下方面：
- 要过滤多大体积？
- 目标是什么？是去除污染物还是浓缩目标物？
- 污染物和目标物的大小如何？
- 是否需要无菌？
- 需要真空、压力、注射器、蠕动泵或其他操作方法吗？
确定上述几点后，即可开始选择产品。
根据作用模式或分离原理分类，有压力、真空、离心、切向流过滤（交叉流过滤）等过滤方式。
过滤器可使用至清楚看到多孔介质堵塞或者污染，以至于样品无法通过，或者流速下降至抑制程度。阻塞前的使用水平取决于样品颗粒载量和多孔材料密度、孔隙率等。阻塞的过滤器有时可通过膜冲洗、反向过滤或化学清洗再生，但这会带来其他问题。
可使用去除微观水平颗粒的过滤器去除细菌。为确保所有活的和完整的细菌细胞被去除，应使用 0.22 µm 孔径的过滤器。通常使用 0.22 µm 纤维素滤膜，例如醋酸纤维素、硝酸纤维素或再生纤维素膜，或聚醚砜或聚四氟乙烯滤膜等 0.22 µm 合成膜去除细菌细胞。如果认证为灭菌级，0.22 µm 孔径滤膜可使生物负荷下降至 10-7 的无菌保证水平 (SAL)，基本上将通过滤膜的样品灭菌。
0.45 µm 孔径过滤器可大量去除较大的细菌和颗粒物。 0.45 µm 孔径过滤器约可去除 >90% 的细菌。但是，要完整去除全部细菌，建议使用 0.22 µm 孔径过滤器。
样品过滤除菌必须使用 0.2 µm 孔径。但是并非所有 0.2 µm 孔径过滤器是除菌级的。为确保样品可靠地除菌，滤膜必须以经验证的程序进行灭菌并有无菌认证，确保在膜的下游侧没有污染的细菌或颗粒物。其次，滤膜必须有通过了使用特别小的缺陷短波单胞菌的细菌挑战性试验 (BCT)的认证说明，以确保滤膜会截留所有 0.2 µm 及以上的细胞，确保得到除菌过滤样品。
支原体是没有细胞壁的细菌。因此，它们是迄今为止最小的一类细菌，具有可延展的结构。去除样品中的支原体需要极小的 0.1 µm 滤膜孔径。这些膜过滤器有针头过滤器、可换膜膜片及真空过滤器规格可选。
滤纸，例如玻璃微纤维滤膜、石英滤膜、技术滤纸和基于纤维素的深层滤膜通常没有标注孔径。而是提供截留率以提供在过滤器基质表面或内部截留的颗粒物大小的信息。除非说明，否则这些截留率不是绝对值，因为它们设计用于捕获和去除较大颗粒物，用于一般澄清应用。
这取决于要过滤的样品、可能的靶标分子/目标颗粒和过滤方法。每种膜有各自的特性。例如，再生纤维素 (RC) pH 范围为 3-14，具有溶剂化学兼容性高、非特异性吸附极低和流速高的特性，因此成为许多液体样品过滤应用中的全能型膜。聚四氟乙烯 (PTFE) 具有 pH 范围特别广 (1-14)、溶剂化学兼容性极高、流速高和非特异性吸附低的特性 - 但它是疏水性的，因此更适合溶剂或气体应用。
要从细胞培养液或细胞培养裂解物中分离靶蛋白和其他分子，可采用过滤步骤，其中细胞、细胞碎片和较大的颗粒被 0.2 µm 或 0.45 µm 孔径的膜截留，而目标分子、宿主细胞蛋白 (HCP) 和其他小细胞产物通过膜，进入到滤液中。为减少膜污染和过滤器堵塞，建议采用预过滤步骤。可使用玻璃纤维素预过滤器进行预过滤，结合更多孔的微孔过滤器实现两步式过滤。同样，助滤剂（例如制药级硅藻土）可直接用于细胞培养液中，在 0.2 µm 膜层上形成预过滤基质层，防止堵塞。
通常采用超滤来浓缩蛋白质。实验室用超滤装置的产品设计包括置于外壳内的超滤膜，该超滤膜经过专门设计，可通过离心、正压、溶剂吸附和切向流分离方法进行浓缩。这些方法使用受控的力，让溶质和非靶标分子通过半透超滤膜进入渗透液，而较大的目标分子截留在截留物中。
有多种纯化方法适用于蛋白质以及病毒载体和外泌体等其他分子。制备层析技术因其高分子特异性和高分离分辨率而成为理想选择，可确保实验室和工艺条件下的高收率和分子纯度。这些层析方法利用一系列化学技术，例如离子交换、亲和配体、疏水作用、空间排斥或上述方法的混合，称为混合模式或多模层析。
纯化工艺中通常整合精细纯化步骤，去除杂质和不需要的分子异构体。它通常是纯化工艺的最后阶段，在需要高水平的分子纯度时会用到。
捕获纯化是目标分子被层析填料特异性靶向并捕获，例如蛋白 A 配体与免疫球蛋白 G (IgG) 结合并被捕获。此时单位样品体积的结合/捕获容量是首要考虑因素。精细纯化步骤用于针对性地去除不需要的分子异构体和其他杂质，例如使用阳离子交换膜吸附剂去除所有带正电的杂质，而让带负电的靶标分子通过介质。
与样品的各种物理接触都可能是浸出物和可提取物 (L&E) 的潜在来源，取决于样品的腐蚀性和化学反应性。评估哪种过滤器材料和过滤器外壳适合避免 L&E 是值得的。大部分膜材料的纯度为 100%，L&E 极低。但是，基于 PTFE、再生纤维素和聚酰胺（尼龙）的膜因良好化学稳定性和高纯度而闻名。此外，聚丙烯 (PP) 外壳材料也不造成 L&E。 为确保避免 L&E，建议使用测试数据证明不含 L&E 的设备和膜，检查样品的化学相容性。
在线文献、论文和研究论坛是很好的应用信息来源。但是，如需各种应用工作流程中过滤方法的具体建议，赛多利斯有丰富的测试数据、技术指南和应用指南，可联系我们获取建议和咨询工作流程。此外，赛多利斯通常免费提供产品样品或演示，帮助用户确认优异实验室过滤工艺。
