用于蛋白、抗体和病毒纯化的膜层析法
在许多生命科学工作流程中,大分子纯化极为重要。但是,基于树脂的离子交换或亲和层析方法通常需要精密的设备和长时间设置,结果流速低且收率不高。传统层析柱较小的孔径和较大的柱床体积会造成体积排阻和稀释效应,限制了纯化更大的大分子的能力,因此需要更多工艺步骤来浓缩稀释的洗脱液,增加试剂消耗。此外,这些纯化工艺难以迁移到生产。
赛多利斯开发了 Sartobind® 膜层析以克服这些困难。有各种规格可选,提供了通过离心、泵或 FPLC 系统纯化的灵活性 - 甚至根本不需要专门仪器。3–5 µm 的孔径可缩短扩散时间,即使是纯化大蛋白质和病毒,也能达到最快 10 倍于以往的速度,高密度配体则提供更大动态结合载量 (DBC)。此外,低柱床体积和可忽略的稀释减少了 75% 的缓冲液需求,确保得到小体积、浓缩的洗脱组分。
这些层析膜可搭配 Vivapure® 和 Sartobind® Lab 装置使用,为研发科学家提供与过滤一样简单的纯化解决方案。此外,Sartobind® 平台也被用于赛多利斯工艺规模膜层析产品,解决了从研究转变到生产的不确定性问题。
Sartobind® Lab 和 Vivapure® 提供:
即用型一次性或可重复使用的纯化耗材提供高度可重现结果,不易受溶解空气的影响。无需装填柱,无需脱气。
具有高动态结合载量的多种层析方法。即使是大体积分子也能利用高密度的离子交换或亲和配体。
使用 Vivapure® IEX 可以同时纯化 2 个、4 个、6 个甚至 24 个样品,本已缩短的处理时间还能进一步缩短。全速前进。
减少了试剂消耗和浪费。小柱床体积只需要一部分基于树脂的层析使用的缓冲液,用于平衡、冲洗和洗脱。
利用离心柱规格的 Vivapure® IEX,离心装置就可变成 FPLC 系统。或者选择 Sartobind® Lab 的针头过滤器设计,这使得纯化无需专门的层析设备,但在需要时仍与之兼容。
无需浓缩。膜吸附解决了稀释效应问题,获得的含靶标组分在分析前无需进一步处理。
Sartobind® Lab 的膜吸附剂不仅适用于实验室。生物工艺行业中已有可放大的形式,可借此实现从研究到进一步开发和生产的便捷转换。
实验室规模膜层析产品
Sartobind® Lab IEX
Sartobind® Lab IDA
Sartobind® Lab Protein A
Vivapure® IEX
Vivapure® 病毒纯化套装
Vivaclear
相关工艺规模膜层析解决方案
常见问题解答
Vivapure® 可提供季铵 (Q)和二乙胺 (D) 阴离子交换或磺酸 (S) 阳离子交换配基。Sartobind® Lab 提供相同的离子交换膜,同时增加了亚氨基二乙酸 (IDA) 用于金属亲和纯化组氨酸标签蛋白,以及Protein A 用于 mAb 和 IgG 靶标
IDA层析膜是实现任意组氨酸标签蛋白高纯度纯化的理想选择,而Protein A 专门用于纯化抗体。考虑到对许多靶标分子的广泛性,离子交换层析膜是理想选择。它们可用于蛋白、病毒或核酸纯化,也建议用于宿主细胞蛋白 (HCP) 和 DNA 去除,以及解决病毒和内毒素问题。
各装置类型的 MV 如下:
- Vivapure® Mini 和 Maxi IEX:0.24 和 2.7 mL
- Sartobind® Lab IEX 或 IDA 15、75 和 100:0.41、2.1 和 2.8 mL
- Sartobind® Lab Protein A:2 mL
Vivapure® 和 Sartobind® Lab 层析膜在大部分常见层析缓冲液中稳定。我们建议避免使用氧化剂。短期 pH 相容性也很广泛,例如,IEX、IDA 或蛋白 A Sartobind® Lab 装置在 2/3–14、1–12 或 2–10 范围内短期稳定。更多信息请参阅使用说明。
与传统基于树脂的层析不同,气泡不可能破坏膜层。因此,无需在纯化前对缓冲液脱气。
为实现极佳靶标分子捕获,我们建议使用与要纯化的样品在组分上类似的缓冲液进行平衡。此过程可用小体积缓冲液快速完成。
是的,可以!Vivapure® IEX 是一次性装置,而 Sartobind® Lab 产品可重复使用多次。在完成每次纯化后,只需要遵循再生和储存方法说明即可。如需获取更多信息,请咨询赛多利斯联系人获取应用指南副本:Sartobind® Lab Q 层析膜提供超过 1,000 个循环的一致结合载量。