应用指南:腺相关病毒 (AAV) 的免离心澄清和收获
作者: Frederik Meierrieks 和 Andreas Pickl
本研究旨在评估 Sartoclear Dynamics® Lab 助滤剂(含硅藻土 (DE))用于澄清 HEK293 悬浮细胞产生的腺相关病毒 (AAV) 粗制裂解物的适用性。实验证明,使用 Sartoclear Dynamics® Lab 助滤剂进行过滤是澄清 AAV2、AAV5 和 AAV8 的可行方法。对于标准 AAV 生产工艺,滤液中的 AAV 颗粒的回收率可达 >95%。即使难以处理的血清型(如 AAV2 和含有较低 AAV 颗粒滴度的裂解物)也可以通过 Sartoclear Dynamics® Lab 过滤进行澄清,病毒回收率 >80%。
概述
本研究概述了一种成功的优化策略,该策略利用实验设计 (DoE) 方法将 AAV2 的产量提高到了 95% 以上。此外,相较于先离心再过滤的实验室标准方法,使用 Sartoclear Dynamics® Lab 助滤剂将手动处理时间缩短了 2/3,并将过滤通量提高了 3.5 倍。
- 页数: 8
- 阅读时长: 14 分钟
- 最新更新日期: 2023年5月
关键要点:
- 为什么 Sartoclear Dynamics® Lab 过滤是澄清 AAV 粗细胞裂解物的可行方法。
- Sartoclear Dynamics® Lab 对浊度降低效果、腺相关病毒 (AAV) 产量和过滤通量,以及手动处理时间的影响。
- 实验设计 (DoE) 研究中,硅藻土 (DE) 浓度和 DE 孵育时间对 AAV2 保留和浊度降低效果的影响。
该资源适用于以下用户:
- 实验室研究人员
支持的应用:
- 生命科学研究
- 澄清
- 病毒载体
- 基因疗法
- 硅藻土 (DE)
- 腺相关病毒 (AAV)