如何提高关键蛋白质样品的回收率:针头滤器滤膜、体积和pH值的影响

样品制备过程中的蛋白质损失是生物学、生物技术和生物制药领域实现产品可靠定量的障碍。面对这类挑战,我们选择了四种典型的针头滤器,并在各种样品条件下,量化了包含两种不同抗体在内的四种模型蛋白质的回收率,以满足众多生物、生物技术和生物制药应用的要求。

选择具有最小蛋白质吸附趋势的滤膜至关重要,不过吸附不仅取决于膜类型,还受到pH和表面电荷等样品和蛋白质特性,以及特定处理步骤(包括每单位过滤面积的样品量)的影响。正因如此,确定合适的条件以显著降低分析物损失能将是一个复杂的多参数问题,我们使用的实验设计(DoE)方法可以提供相关指南,以说明能够在样品制备过程中显著降低分析物损失的条件和膜类型。

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