预装层析柱

层析条件的快速筛选对于确定最佳纯化条件是必需的。可在实验室层析系统或其他自动化设备上进行层析条件的摸索。尤其是像新型功能复合层析介质,需要稳定的筛选工具进行工艺过程的开发。

为您的层析工艺寻求合适的解决方案

PRC预装柱和Robo柱是快速筛选纯化过程开发的有力工具。这两种型号产品都采用离子交换、复合模式和亲和层析介质进行预填充。

特性

 筛选用Robo柱

 PRC预装柱

柱体积 

200和600 µL  

1和5 mL 
柱床高度10和30 mm 

50和100 mm  

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筛选用Robo柱

筛选用Robo柱以8个预装柱一组的形式供应。200µL装置适用于筛选纯化条件和层析介质筛选。若保留时间4分钟以上(例如评价动态结合载量),建议使用600µL装置。

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高通量层析介质的筛选与优化 

ScreenExpert RoboColumns是一种预装有层析介质的微型层析柱。它们的设计适用于自动化和对比层析分离纯化,可配合自动液体处理工作站使用,如Tecan的Freedom EVO®

ScreenExpert Robo 层析柱柱可根据客户的需求,装填阴离子交换、混合模式、亲和或其它类型的层析介质。 

提供200μL和600μL两种规格,柱床高度分别为10和30 mm。200μL柱体积层析柱可进行层析介质和工艺条件筛选,600μL柱体积用于纯化工艺优化或保留时间超过4分钟(例如复合模式填料结合载量的研究)时使用。

层析柱由8个条形预装单元组成,带有两个可拆卸的硅盖密封件,便于妥善储存。一个96孔板排布多达96个ScreenExpert RoboColumn单元。

优势

  • 层析柱规格和高质量填充使其能够在动态模式下模拟层析分离的所有步骤。实验数据与较大层析柱中获得的数据具有可比性。
  • 缩小模型的层析柱便于色谱介质的筛选,减少样品消耗,节省时间。
  • 完全符合实验设计(DoE)的要求,可在最短的时间内进行大量的实验工作
  • 96孔结构可方便地与自动化系统集成,用于高通量工艺开发(HTPD)
  • 可以并行检测多个参数,例如保留时间
  • 可重复使用
  • 使用灵活:用户可按需要选择层析柱

处理

ScreenExpert RoboColumns专为自动化操作而设计。

若使用ScreenExpert RoboColumns进行高通量工艺开发方法,建议采用实验设计(DoE)标准进行实验设置。这使得能够同时高效地筛选许多不同的层析参数,如树脂类型、pH值、电导率/离子强度等。

对于96孔阵列板的实验设置和配置,建议使用Te-Chrom向导。Te Chrom Wizard是Tecan提供的对话框的图形用户界面,基于Freedom EVOware软件。Te Chrom Wizard是为使用ScreenExpert RoboColumns开发的,它可以配置硬件、板布局和层析工艺以及设置所有与工艺相关的层析参数,例如流速、体积等等,而无需直接编写脚本。

* MediaScout和RoboColumn是Atoll GmbH的版权。LabChip是PerkinElmer的一个版权。Freedom EVO、Freedom EVOware和Te Chrom是Tecan集团的版权。

ScreenExpert RoboColumn适用于多种应用,如:

  • 层析吸附剂的平行筛选
  • 下游工艺开发中层析条件的平行筛选和优化(电导率、pH)
  • 降低实验工作量
  • 动态结合载量测定
  • 最佳保留时间测定
  • 再生步骤优化

ScreenExpert Robo柱

柱体积

200 μL

600 μL

柱床高

10 mm

30 mm

柱内径

5 mm

柱材质聚丙烯
化学稳定性所有常用的缓冲水溶液,pH范围为1-14
避免卤代有机溶剂,己烷
储藏溶液20% 乙醇/1 M NaCl
建议储存温度

2 到 8 °C

工作温度

4 到 30 °C

最大工作压力高达8.0 bar(116 psi g)
流速16 to 1,000 cm/hr 1

激光标签

每根柱体上均有激光标签,标注:
  • 产品名
  • 吸附剂名称
  • 柱体积(μL)
96孔阵列板

尺寸

128.3 x 86.0 x 14.0 mm

材质

共聚甲醛

孔数量

96

1 Te-Chrom™ Wizard的液体转移菜单™ 向导允许为每个单独的分装和层析步骤设置流速(5.1.1.6液体转移,Te Chrom Wizard软件手册,396076,英文版V1.0)。

RoboColumn™规格 - 用于高通量层析树脂筛选和优化

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PRC预装柱

PRC预装柱有1和5 mL两种规格,便于使用。建议使用1 mL层析柱来纯化条件摸索,之后可用5 mL层析柱和10cm床高进行验证以及进一步优化。 

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HyperCel™ STAR AX吸附剂的PRC预装层析柱

HyperCel™ STAR AX 耐盐阴离子交换吸附剂的PRC预装层析柱

HyperCel™ STAR AX吸附剂由刚性纤维素基质组成,具有高流速,反向压力低。该产品为方便的预装层析柱,是快速筛选和条件优化的理想选择。两个或两个以上的层析柱可以串联,以增加柱高,并在中试规模或缩小规模的应用中进行更接近实际情况的模拟。

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HyperCel STAR AX阴离子交换剂的快速选择性筛选

  • 方便 - 即用型1 mL和5 mL预装柱
  • 易于使用 - 直接连接到常用的实验室层析系统
  • 高效– 装填效率高(≥ 2500 塔板/米)。
  • 一致性 - 筛选HyperCel STAR AX吸附剂能够可靠地重现的层析条件,保证每次运行的性能。


“耐盐”阴离子交换层析吸附剂

HyperCel STAR AX吸附剂由刚性纤维素基质组成,具有高流速,反向压力低。具有以下特性:

  • 保留时间短、动态结合载量高
  • 可在捕获、中间步骤及精纯步骤中使用
  • 在15 mS/cm的高电导率下仍能保持高动态结合载量
  • 层析柱可直接放大到中试规模或生产规模

在1mL PRC柱中进行快速筛选和条件优化,可以快速选择合适的分离条件。若在1 ml PRC层析柱确定了分离条件,就可在5mL PRC柱中优化使用此条件。

两个或两个以上的层析柱可以串联,以增加柱高,以模拟更接近实际情况的中试或缩小规模的条件。通过填充Pall LRC空玻璃柱,可以通过最小程度的重新优化实现进一步的放大。


HyperCel STAR AX阴离子交换层析吸附剂

  • 天然和重组蛋白
  • 疫苗
  • 单克隆抗体和多克隆抗体
  • 血浆衍生物
  • 生物药品
吸附剂
体积1 mL (5 mm I.D. x 50 mm) 或 5 mL (8 mm I.D. x 100 mm)
平均粒径

60 – 90 µm

动态结合载量1pH值7.5 – 8.0范围(电导率2-15 mS/cm)>100 mg BSA/mL
配体伯胺
储藏溶30%异丙醇,100 mM磷酸钠, pH 4.3
工作pH结合:pH 7.0 – 8.5; 洗脱: pH 3.0 – 8.5
清洗pH

1 – 14

工作压力21 mL柱< 0.5 bar (7 psi) ; 5 mL柱< 1 bar (14 psi) 
层析柱
外形尺寸1 mL柱10 x 100 mm ;5 mL柱 11.5 x 140 mm 
结构材料柱体和端盖:注塑PP(聚丙烯)
17 µm筛板:PP / PE (聚丙烯 / 聚乙烯)
接头:3内置10-32个配件


1 使用含5 mg/mL牛血清白蛋白(BSA)的50 mM Tris-HCl溶液(pH8.5)在10%流穿、保留时间(RT)2分钟时测定。通过补加NaCl调节电导率在2 – 15 mS/cm之间。
2 流速600 cm/hr时压力等于:1 mL柱为2 mL/min,5 mL柱为5 mL/min,在0.1 M NaCl中。

MEP、HEA、PPA等吸附剂的PRC预装层析柱

MEP、HEA和PPA HyperCel™ 吸附剂利用稳定的合成配体的独特选择性捕获蛋白质或将其从污染物中分离出来。它们具有不同于传统方法的独特分离机制。通常在不添加盐的情况下,配体主要通过类HIC”的相互作用进行层析。这类预装柱能够方便地实现快速筛选和条件优化。

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MEP、HEA和PPA-HyperCel混合模式吸附剂的快速选择性筛选

  • 方便 - 即用型1 mL和5 mL预装柱
  • 易于使用 - 直接连接到常用的实验室层析系统
  • 高效– 装填效率高(≥ 2500 塔板/米)
  • 一致性 - 筛选混合模式层析吸附剂能够可靠地重现的层析条件,保证每次运行的性能


用于抗体捕获的混合模式层析吸附剂和“无盐”疏水作用

PPA HyperCel™ 吸附剂利用稳定的合成配体的独特选择性捕获蛋白质或将其从污染物中分离出来。它们具有不同于传统方法的独特分离机制。通常在不添加盐的情况下,配体主要通过类HIC”的相互作用进行层析。

在1mL PRC柱中进行快速筛选和条件优化,可以快速选择合适的分离条件。若在1 ml PRC层析柱确定了分离条件,就可在5mL PRC柱中优化使用此条件。

两个或两个以上的层析柱可以串联,以增加柱高,以模拟更接近实际情况的中试或缩小规模的条件。


用于抗体捕获的混合模式层析吸附剂和“无盐”疏水作用

  • MEP HyperCel吸附剂:抗体捕获;传统疏水作用的替代选择
  • MEP、HEA、PPA HyperCel吸附剂:疏水作用的无盐/低盐替代选择

吸附剂规格

体积
1 mL (5 mm ID x 50 mm)
5 mL (8 mm ID x 100 mm)

功能

混合模式:MEP、HEA、PPA HyperCel吸附剂

储藏溶液

30%异丙醇/100 mM磷酸钠, pH 4.3

工作压力1
< 0.5 barg (7 psig)


层析柱规格

外形尺寸
1mL柱10 x 100 mm

5mL柱11.5 x 140 mm


结构材料
柱体和端盖:注塑PP

17 µm筛板:PP / PE (聚丙烯 / 聚乙烯)

接头:

内置10-32个配件

最大工作压力
1mL柱20 bar (290 psig)

5mL柱30 bar (435 psig)

1 600 cm/h的压力相当于0.1 M NaCl中的2 mL/min。
混合模式吸附剂配体平均粒径(µm)配体密度(µmole/mL)动态结合载量 (mg/ml)1

MEP HyperCel

4-巯基乙基吡啶 (pKa = 4.8)

90

80 – 125

> 202

HEA HyperCel

己胺(脂肪族)(pKa = 8.0)

90

58 – 84

> 403

 PPA HyperCel

苯丙胺(芳香族)(pKa = 8.0)

90

58 – 80

> 403
1 10%流穿时测定
2 5 mg/mL人IgG的PBS溶液, 流速60 cm/h
3 5 mg/mL BSA的PBS溶液, 流速100 cm/h

赛多利斯提供从实验室规模到生产规模的各种层析柱。

PRC柱
1 – 5 mL(预装柱)

快速选择性筛选

  • 采用Q和CM Ceramic HyperD离子交换吸附剂
  • 采用MEP、HEA和PPA-HyperCel混合模式吸附剂

Resolute®
6 - 300 L

中试和小规模生产

Resolute® 柱
50 - 1500 L
大规模生产

装有Q和CM Ceramic吸附剂的PRC预装层析柱

Q和CM Ceramic HyperD™ 吸附剂含有一种在刚性陶瓷珠的巨孔内聚合的高容量水凝胶。该产品为方便的预装层析柱,是快速筛选和条件优化的理想选择。

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Ceramic HyperD离子交换剂的快速选择性筛选

  • 方便 - 即用型1 mL预装柱
  • 易于使用 - 直接连接到常用的实验室层析系统
  • 高效– 装填效率高(≥ 2500 塔板/米)
  • 一致性 - 在可靠及可重现的层析条件下进行筛选Pall离子交换层析吸附剂,保证每次运行的性能


离子交换层析吸附剂

Q和CM Ceramic HyperD吸附剂含有一种在刚性陶瓷珠的巨孔内聚合的高容量水凝胶。典型特点:

  • 与流速无关的高动态结合载量
  • CM Ceramic HyperD HyperD吸附剂在导电率为10至15 mS/cm时具有高结合载量,可直接捕获IgG 

PRC柱有助于确定最佳填充和使用条件下的最佳选择性和分辨率。

在1mL PRC柱中进行快速筛选和条件优化,可以快速选择合适的分离条件。

两个或两个以上的层析柱可以串联,以增加柱高,以模拟更接近实际情况的中试或缩小规模的条件。


离子交换层析吸附剂

  • 天然和重组蛋白
  • 质粒
  • 疫苗
  • 单克隆抗体和多克隆抗体
  • 血浆衍生物
  • 生物药品

吸附剂规格

体积
1 mL (5 mm ID x 50 mm)

功能
离子交换:Q和CM Ceramic HyperD F吸附剂

储藏溶液
20% 乙醇/150 mM NaCl

工作压力1
< 1.5 barg (22 psig)


层析柱规格

外形尺寸
1mL柱10 x 100 mm

结构材料
柱体和端盖:注塑PP
17 µm筛板:PP / PE (聚丙烯 / 聚乙烯)

接头:
内置10-32个配件

最大工作压力
1mL柱20 bar (290 psig)


1 600 cm/h的压力相当于0.1 M NaCl中的2 mL/min.
吸附剂平均粒径(µm)可电离基团(µEq/mL)动态结合能力 (mg/ml)1
离子交换化学条

Q Ceramic HyperD F

季铵

50

> 250

> 852

CM Ceramic HyperD F

羧甲基

50

> 250

> 603
1 10%流穿时测定
2 含5 mg/mL BSA的50 mM Tris-HCl缓冲液, pH 8.6, 流速200 cm/h
3 含5 mg/mL 人IgG的50 mM醋酸钠缓冲液,100 mM NaCl,pH 4.7, 流速200 cm/h

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