疏水层析(HIC)
当今的生物工艺需要更精确和更有效的操作。疏水层析 (HIC) 根据分子表面疏水性来分离分子。这项技术被广泛应用于色谱纯化,与其他方法如离子交换(IEX)或亲和相比,是一个更精确的纯化步骤。HIC通常需要高盐浓度,以便有效结合靶蛋白。因此,最好是在层析步骤后使用,在层析步骤(如离子交换层析)中用高盐浓度可完成洗脱。
赛多利斯拥有一系列HIC模式(树脂、膜和整体柱)来匹配您的应用。
HIC中的Sartobind® 膜
Sartobind® 苯基-易于去除骨料
Sartobind® 苯基是一种低配体取代的疏水性相互作用膜。这使得可以采用温和的洗脱条件纯化所有生物分子。
Sartobind® 苯基膜可被视为精制(流通)操作和许多结合和洗脱应用的色谱柱的替代物,因为它们在纯化大生物分子时可以在更高流速下工作,降低复杂性,并且没有尺寸排斥效应。
突破10%时的典型动态结合能力(DBC)为:
• 9-13 mg/mL mAb
• 10 mg/mL BSA
• 23 mg/mL溶菌酶
用于HIC的整体柱
疏水层析(HIC)的选择
疏水层析(HIC)是核酸分离的必要手段。当与整体柱层析的优点相结合时,HIC满足了这一需要,同时也为包括腺相关病毒(AAV)在内的大生物分子的纯化提供了极好的解决方案。
流道尺寸 | 1.3, 2, 6 µm | 2, 6 µm |
柱体积 | 1 mL – 8 L | 1 mL – 8 L |
检测范围,pH | 2 – 10 | 2 – 10 |
功能 | 弱疏水性 | 强疏水性 |
典型应用 | 病毒,(如AAV)和VLP | 核酸(pDNA、mRNA) |
CIMmultus® OH – 疏水层析
不带电的(中性)配体
检测范围,pH 2-10
在盐沉淀或聚乙二醇存在下可保留非常大的溶质(病毒颗粒、VLP、囊泡)
按尺寸递增顺序洗脱大溶质,分离率高
用盐沉降或聚乙二醇洗脱
可用1 M NaOH进行消毒