抗体筛选

想要成功进行抗体发现,快速识别和表征与靶点反应的候选分子是关键。本案例研究展示了 iQue®高通量流式细胞仪在靶细胞系建立、小鼠血清评估和杂交瘤细胞文库筛选中的应用。

抗体筛选应用

快速评估经细胞表面靶抗原转染的克隆。选择靶抗原高水平表达的健康克隆,确保下游杂交瘤细胞筛选的理想结果。

提高生产率

400 个工程细胞克隆用于高表达靶抗原的筛选。

在 1 小时内完成 5块 96 孔板的运行和分析。

功能强大的多重筛选分析

基于细胞的多重分析可在可一步筛选出健康生长且高表达表面抗原的细胞系。

快速方便、可视化的结果

使用 Profile Map 实现高水平表达靶抗原和高细胞数量的克隆的可视化。

靶细胞系建立的筛选结果可视化

使用 ForeCyt®软件进行筛选结果的可视化。细胞经慢病毒编码靶抗原转导后,在选定的压力下培养,并分类保存至 96 孔板中。待细胞生长后,将等份细胞转移到检测板上,在 iQue®高通量流式细胞仪上使用该抗原的特异性荧光标记抗体检测表面抗原的表达,同时测定细胞数量,作为细胞生长的指标。

Profile Map 显示,含有大量细胞的加样孔中,细胞表面靶抗原高水平表达。

孔板视图显示了细胞表面靶抗原表达水平的详细信息。叠加未转染的对照细胞表达的数据可直观显示阳性克隆。

需进行大规模基于细胞的实验,以识别产生高水平靶抗原特异性抗体的免疫小鼠。同时检测几十只免疫小鼠的血清可提高产生最佳抗体反应性杂交瘤细胞的成功率。

提高生产率

对 36 只免疫小鼠的血清进行细胞表面靶抗原结合检测。

将免疫前和免疫后的小鼠血清稀释 8 倍,进行重复检测。

功能强大的多重筛选分析

基于细胞多重分析可一步筛选出与靶抗原结合(而不结合其他抗原)的血清。

快速方便、可视化的结果

使用热图可视化处理含有结合靶抗原(而不结合其他抗原)的高滴度抗体的小鼠血清。

小鼠血清评估筛选结果的可视化

使用 ForeCyt®中的 HeatMap 功能将检测结果进行可视化处理。采用细胞荧光编码染料将 3 个细胞系进行染色编码,混合后转移至 384 孔板中。将血清样品加入到每个孔中,然后采用荧光检测抗体,通过 iQue® 高通量流式细胞仪对孔板进行分析。对 36 只小鼠免疫前和免疫后的血清进行 8 倍稀释,然后进行重复检测。

HeatMap 显示了抗体与对照细胞、表达靶抗原的细胞和表达不相关抗原的细胞结合的结果。

一种高通量的多重筛选,可同时进行多个靶抗原(对照抗原除外)的结合检测。整个筛选和数据分析过程可在一天内完成。

提高产率

从 2 只不同的免疫小鼠中筛选出 9600 个杂交瘤细胞克隆。

可在 1 天内完成 25 × 384 孔板的运行和分析。

功能强大的多重筛选分析

基于细胞多重分析可一步筛选出与靶抗原结合(而不结合其他抗原)的抗体。

快速方便、可视化的结果

28800 个数据点可立即组合和处理到结合指标中。

可观察到 53 个与靶抗原(而非对照抗原)结合的结果。

杂交瘤细胞文库筛选结果的可视化

使用 ForeCyt®中的 Panorama 功能将整个筛选结果进行可视化处理。采用荧光细胞编码器染料将 3 个细胞系进行荧光编码,混合后加样至 384 孔板的孔中。在每个加样孔中加入杂交瘤细胞上清液,然后进行抗体荧光检测。使用靶抗原表达细胞检测从 2 只不同的免疫小鼠的 9600 个杂交瘤克隆。整个筛选过程可在一天内完成。

HeatMap(红色)显示了抗体与对照细胞、表达靶抗原的细胞和表达有联系但不相关抗原的细胞结合的结果。

Profile Map(蓝色)将结合结果与三种类型细胞进行合并,显示了与靶抗原表达细胞结合的抗体,但与不相关抗原表达或阴性对照细胞不结合的抗体。

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