T 细胞应用
CD3xCD19 BiTE 抗体诱导细胞毒性和靶细胞聚集。Ramos NucLight 绿色细胞与 PBMC 共同接种,使用 BiTE 抗体 (anti-hCD3xCD19) 或对照抗体 (anti-hCD3xβGAL) 激活。在 (A) 对照抗体或 (B) BiTE 抗体的存在下 72 小时的代表性图像。跟踪靶细胞数量 (C) 和聚集 (E) 的 Incucyte® 时间进程数据(每 3 小时采集一次图像)。采用包括亮度和大小的绿色累积强度度量 (GCU × μm2) 的折射率变化来定量靶细胞。与对照抗体相比,BiTE 抗体存在时靶细胞杀伤 (D) 和聚集 (F) 的 72 小时浓度响应曲线。
活化的 PBMC 对肿瘤球增殖的影响。将稳定表达核限制性 RFP 的 A549 肿瘤细胞接种在一个圆底 ULA 96 孔板中,培养 3 天,待其形成肿瘤球。肿瘤球形成后,在含或不含 Anti-CD3 和 IL-2 抗体混合物的条件下,与新分离的 PBMC 进行共培养。Incucyte® HD 相位图和荧光图像显示了 PBMC 在不含抗-CD3 和 IL-2 抗体(未活化,上图)和含抗-CD3 和 IL-2 抗体(已活化,下图)的情况下对肿瘤球增殖的影响对比。注意到,活化的 PBMC 存在时,肿瘤球的荧光强度明显减弱。时程图显示了肿瘤球的细胞毒性(根据荧光强度随时间的损失来定量)。数据收集时间为 7 天,每间隔 6 小时采集一次图像。每个数据点代表平均值 ± SEM,n = 3 孔。
参考文献
集群
Zumwalde et al, 2013 J Immunol. October 1; 191(7): 3681–3693. doi:10.4049/jimmunol.1201954.
免疫细胞杀伤
McCormack et al, 2013 Cancer Immunol Immunother. Apr; 62(4): 773–785. doi:10.1007/s00262-012-1384-4