神经元细胞健康与形态学概述

使用自动、长期成像和分析捕获神经网络中显著和微小的动态变化，以检测神经突的生长或破坏，以及细胞的健康状态。

图 1.使用生理学相关的体外模型，能更准确地描绘人类神经退行性疾病，获得有价值的生物学启示。帕金森病 Dopa.4U 细胞模型 (Axol Biosciences) 中 6-羟多巴胺 (6-OHDA) 介导的毒性定量分析。使用 Incucyte^® Neurolight 慢病毒感染 Dopa.4U 细胞，然后使用 20 倍物镜对细胞每 6 小时进行一次成像，连续 12 天。在 IC50 浓度为 84 µM 的条件下，6-OHDA 可使神经突长度呈时间和浓度依赖性下降。

减少人为干预，保护脆弱的神经突。在单一培养中进行无标记神经突分析，或在与 Incucyte^® Neurolight橙色慢病毒的共培养环境中进行简单的无干扰荧光标记。用无干扰、可即混即读的 Incucyte^® Annexin V橙色染料检测细胞凋亡。无需固定、染色或消化。

图 2.在 96/384 孔的通量条件下，自动进行神经突长度、分支点和细胞体集群的无标记分析。使用 Incucyte^® Neurotrack分析软件模块可轻松分割大鼠皮层神经元的高清相位图像 (HD)，识别神经突和细胞体 (A)。PlateGraphs 可显示每个孔的动态数据，迅速可视化和评估 384 孔筛选板的处理趋势 (B)。

图 3.在共培养环境中，使用无干扰型试剂对神经突进行长时间的动态分析。使用 Incucyte^® Neurolight 橙色慢病毒感染不同类型的神经元细胞，确保神经元特异性标记。星形胶质细胞存在的情况下培养的大鼠皮层神经元在第 10 天用谷氨酸处理，并在 14 天内进行转导和成像 (A)。时间进程分析显示神经突长度对谷氨酸处理有浓度依赖性作用 (B)。

图 4.连续无创地测量细胞活性的时间进程和浓度依赖性作用。Incucyte^® Annexin V 橙色染料不会干扰细胞的健康和形态，还能产生易于测定的荧光信号，可指示细胞凋亡。通过分析整个实验过程的图像和视频中的荧光信号，观察细胞凋亡动力学 (A)。使用动力学读数，分析神经元培养物浓度依赖性处理的时间进程 (B)。

在单独培养或共培养环境中，用于神经突分析和细胞健康实验的Incucyte^® 试剂与 iPSC 源细胞或原代细胞兼容。

图 5.在您首选的原代或 iPSC 源神经细胞类型中检查神经退行性疾病的读数。Incucyte^® Neurolight橙色慢病毒试剂可在共培养环境中选择性标记神经突，用于分析神经突的长度。本例中检测了 Dopa.4U、 hNPC、 iCell 和 Peri.4U 细胞。

使用适合药理学分析的数据支持药物的开发研究。使用易于生成、高度可重现的高通量数据评估多种实验条件。采用我们的完整解决方案（包括实验室测试试剂、活细胞方案和专用软件工具），虽然花费了更多的检测时间，但同时减少了更多排除问题的时间。

图 6.在 6 × 96 或 6 × 384 孔板中平行使用尽可能少的细胞，通过连续自动图像采集快速生成一致、大批量的数据集。iCell 神经元神经突长度的时间进程曲线显示，在 384 孔板中培养 11 天的方案重现性很高 - CV < 15% (A)。384 孔板显示出药理学可重现性，可轻松生成 EC/IC₅₀ 曲线 (B)。