疏水层析(HIC)

当今的生物工艺需要更精确和更有效的操作。疏水层析 (HIC) 根据分子表面疏水性来分离分子。这项技术被广泛应用于色谱纯化,与其他方法如离子交换(IEX)或亲和相比,是一个更精确的纯化步骤。HIC通常需要高盐浓度,以便有效结合靶蛋白。因此,最好是在层析步骤后使用,在层析步骤(如离子交换层析)中用高盐浓度可完成洗脱。

赛多利斯拥有一系列HIC模式(树脂、膜和整体柱)来匹配您的应用。


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聚集体去除

去除聚集体的有效方法


补充纯化

最好在初始样品清理和IEX层析后使用


生物分子高效精制

很适合最后的精制步骤或中间体大分子的纯化


为您的疏水层析工艺寻求合适的解决方案

HIC主要用于聚集体去除,因为它在该功能方面具有优越的性能。
 

树脂对中小型蛋白质具有良好的结合能力,而混合型树脂通常结合了HIC和IEX的作用机制。

与树脂相比,膜对病毒、病毒样颗粒和其他大型复合物具有更高的结合能力,并且还具有更高流速的优势,从而可以缩短工艺时间并提高生产率。

HIC整体柱是分离质粒DNA亚型的关键。


薄膜

整体柱

应用

大生物分子的捕获,所有生物分子的精制

生物大分子的捕获与精制

执行  

批内多用,批间单用

批内多用,批间单用

易用性 

随时可用

随时可用

可放大性  

用于线性放大的胶囊和箱体

多种设备尺寸

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HIC中的Sartobind®

Sartobind® 苯基-易于去除骨料

Sartobind® 苯基是一种低配体取代的疏水性相互作用膜。这使得可以采用温和的洗脱条件纯化所有生物分子。 

Sartobind® 苯基膜可被视为精制(流通)操作和许多结合和洗脱应用的色谱柱的替代物,因为它们在纯化大生物分子时可以在更高流速下工作,降低复杂性,并且没有尺寸排斥效应。

突破10%时的典型动态结合能力(DBC)为:
•    9-13 mg/mL mAb
•    10 mg/mL BSA
•    23 mg/mL溶菌酶

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用于HIC的整体柱

疏水层析(HIC)的选择

疏水层析(HIC)是核酸分离的必要手段。当与整体柱层析的优点相结合时,HIC满足了这一需要,同时也为包括腺相关病毒(AAV)在内的大生物分子的纯化提供了极好的解决方案。


CIMmultus® OH

CIMmultus® C4-HLD

流道尺寸

1.3, 2, 6 µm

2, 6 µm

柱体积

1 mL – 8 L

1 mL – 8 L

检测范围,pH 

2 – 10

2 – 10

功能

弱疏水性

强疏水性

典型应用

病毒,(如AAV)和VLP

核酸(pDNA、mRNA) 

CIMmultus® OH – 疏水层析

  • 不带电的(中性)配体

  • 检测范围,pH 2-10

  • 在盐沉淀或聚乙二醇存在下可保留非常大的溶质(病毒颗粒、VLP、囊泡)

  • 按尺寸递增顺序洗脱大溶质,分离率高

  • 用盐沉降或聚乙二醇洗脱

  • 可用1 M NaOH进行消毒

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CIMmultus® C4-HLD—疏水层析

  • 强疏水性,(不带电的)配体

  • 检测范围,pH 2-10

  • 高效去除核酸(pDNA、RNA)中的蛋白质

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