CAR-T 细胞：功能和表型筛选
在完成嵌合抗原受体 (CAR) 构建体的设计和评估并且要推进到扩增阶段时，我们需要量化细胞的表型和功能，以确保维持所需的细胞特征。
赛多利斯提供体外、基于细胞的功能和表型分析平台，能够对关键 CAR-T 细胞功能进行定量和预测性评估，从而促进有效和新颖的 CAR-T 治疗的发现。
- 评估转化为体内功能的参数
- 更好地了解 T 细胞生物学
- 简化有效 CAR-T 候选药物的发现
功能和表型筛选解决方案
iQue® 高通量流式细胞平台
iQue® 高通量流式细胞平台具有一个较宽的固定动态范围，研究人员可以基于该范围评估 CAR-T 细胞的表型和功能，避免不同时间点的差异，并且无需拆分样品进行后续分析。高通量平台提供的检测方法可以实现以下几点：
- 提供可重复且生物学相关的结果
- 评估细胞对靶标的功能反应性
- 结合功能读数来评估细胞表型，功能读数包括估计效应细胞激活和细胞毒性杀伤
- 只需要一份样品即可同时定量分泌细胞因子水平和表型
- 量化抗原和免疫抑制分子的肿瘤表达
特色分析产品：iQue® 人 T 细胞活化和细胞因子分析试剂盒
iQue® 人 T 细胞活化和细胞因子分析试剂盒能够评价 T 细胞的活化状态，同时还能提供关于细胞健康及其在细胞因子分泌中的作用的相关信息。这种单次清洗分析需要的手动操作时间极少，可测定细胞和微球，提供以下生物学信息：
- 使用膜完整性荧光染料进行染色，区分活免疫细胞与死细胞。
- 对细胞进行免疫表型分析，使用荧光抗体 panel 染色区分 CD3+ T 细胞、CD3-非 T 细胞、CD4+ T 辅助细胞、CD8+ 细胞毒性 T 细胞。
- 根据 3 个活化标记物的表达分析 T 细胞表型 - CD69（早期表达）、CD25（晚期表达）和 HLA-DR（更晚期表达，在强烈刺激下）。
采用优化的工作流程，可在单孔中测定活化 T 细胞分泌的效应细胞因子 - Th1 细胞因子 IFNγ/多功能细胞因子 TNFα。
Incucyte® 活细胞分析平台
Incucyte® 活细胞分析系统经过精心设计，可有效捕获孵育箱培养箱中发生的细胞变化。在 T 细胞的功能和表型评估方面，该系统可以深入了解基础生物学，例如免疫细胞激活、增殖和杀伤的机制。
- 使用集成图像采集和分析来识别细胞激活状态，提高生物洞察力
- 对细胞健康、表型、亚群和功能进行非侵入性、非破坏性和无偏倚的分析
- 了解免疫细胞和癌细胞动态相互作用的新见解
使用以下 Incucyte® 活细胞应用套件加快您的发现步伐：
特色活细胞分析检测：CD19 靶向 CAR-T 细胞杀伤抗原阳性靶细胞
展示 CD19 靶向 CAR-T 细胞的特异性杀伤特性
Incucyte® 免疫细胞杀伤实验可用于量化 CAR-T 细胞的功能活性。量化图像表明，随着时间的推移，Ramos 靶细胞的 CAR-T 细胞密度显著下降。
Incucyte® Nuclight 绿色试剂标记的 Ramos 或 Jurkat 细胞与抗 CD19 CAR-T 或对照 T 细胞在 96 孔板中以不同的 T:E 比例进行共培养。在 4 天内，每 4 小时使用 Incucyte® 对培养物成像，并对绿色荧光面积定量。72 小时拍摄的图像 (A) 显示与 CAR-T 细胞 (1:2 T:E) 结合的 Ramos 细胞的绿色荧光面积显著减少。时程图（B 和 C）表明，与抗原阴性 Jurkat 细胞相比，抗原阳性 Ramos 细胞的杀伤力有所增加。显示的数据为 3 个孔的平均值 ± SEM。
赛多利斯功能和表型解决方案的优势：
iQue® 高通量流式细胞仪平台可以省去多次分析的麻烦，在一次实验中通过测量细胞健康状况和基于微珠的细胞因子分泌来获取免疫表型数据。
使用更少的细胞和试剂，更快地评估多项细胞参数。
- 免疫细胞杀伤
- 免疫细胞评估
- 细胞因子分析
iQue® 高通量流式细胞仪和 Incucyte® 活细胞分析系统集成了功能强大的软件，用户可以即时访问实时数据，借助更好的可视化工具和动态门控功能，轻松解释复杂的数据集。
赛多利斯基于细胞的功能和表型定量检测提供了可转化为临床结果的见解。iQue® 高通量流式细胞仪和 Incucyte® 活细胞分析系统可结合使用，对免疫细胞驱动的肿瘤杀伤进行可视化和量化并对细胞实现详细表征，如生物标志物表型、三系分化能力、活力、耗竭和杀伤效果。
常见问题解答
iQue® 高通量流式细胞仪平台 可以对悬浮细胞和磁珠进行高通量测定，您可以通过编码技术实现强大的多重方法。借助编码技术，您可以将带有不同目标抗原的多个细胞群或磁珠整合到测定板的孔中，从而在同一实验中筛选多种靶抗原。例如，iQue® 可以在单次分析中根据增殖、细胞因子分泌和细胞亚群改变（免疫表型）来测量 T 细胞活化。
Incucyte® 高级非标记分类分析软件模块 采用成熟的非标记采集方案以及根据形态轻松识别目标细胞群或免疫细胞群的高级分析方案，能够为您提供一套完整的解决方案。