iQue® Qbeads®
生物学相关分泌蛋白和细胞因子的定量在基础研究和药物开发中至关重要，对于理解炎症和肿瘤学中的 T 细胞活化和细胞信号级联放大作用等都有极大帮助。在过去的十年里，有越来越多的研究开始关注炎症过程和疾病状况，而这些研究都涉及到细胞因子的测定和分析。这些研究的实施都需要从任何给定样品中的多种生物分子中检测、定量和区分特定或多种细胞因子的能力。目前，研究人员通过多种成熟的免疫分析技术来分析各种疾病模型和探索性研究领域中的分泌蛋白水平，如酶联免疫吸附测定 (ELISA)、基于流式细胞术的多重分析。然而，传统的蛋白分泌物测量技术存在以下弊端：
- 通量较低、费时费力，需要标记、方案优化、长时间培养和重复清洗等步骤
- 需要通过离心将上清液从细胞中分离出来
- 通常每个样品只能分析一种分析物，数据变异性增加，并会消耗大量珍贵的样品和试剂
- 需要手动进行复杂的数据分析以生成数据
借助丰富的 iQue® Qbeads® Plexscreen 的系列试剂，研究人员可通过不同类型的微球捕获来分析分泌蛋白，从而实现生物参数的多重定量。客户可以从 50 多种分析物中选择，定量分析人类、小鼠或大鼠的分泌蛋白，或使用 iQue® Qbead® Devscreen 试剂灵活地将自制的捕获抗体或目标蛋白质粘附于微球上。iQue® Qbeads® 具有高度的可重现性，可显著降低样品用量（低至 2 µL）和获得结果的时间，且完全无需手动操作和清洗步骤。用户可以将 iQue® Qbeads® 检测与其他 iQue® 分析试剂盒结合使用，通过简化的无缝工作流程，对蛋白质分泌、细胞活力、标志物表达和增殖进行高通量测量。使用集成式 iQue® ForeCyt® 软件节省宝贵的样品和时间，获取实时的药理学分析结果。贴壁细胞或悬浮细胞中分泌的细胞因子和信号分子定量从未如此简单！
关键优势
高通量分析 - 在 96 或 384 孔板中快速定量分泌蛋白，促进筛选和分析研究。
细胞因子的多重定量 -使用定制或预配置 panel 在单个样品中分析多达 30 种分泌蛋白的浓度。
同时定量细胞因子和细胞数 - 与其他 iQue® 分析试剂盒和/或抗体结合使用，联合分析细胞功能和亚群。
最大程度地提高检测效率 - 减少试剂成本和获取结果的时间 - 通过简便且免洗的方案进行分析，只需使用 2 µL 样品。
实现高通量分析
在 96 或 384 孔板中快速定量分泌蛋白，完成筛选和分析研究。
图 1.使用 384 孔板规格在最短时间内定量细胞因子分泌物。
在混合淋巴细胞反应 (MLR) 分析中，单独接种（单供体对照组）或组合接种来自多个供体（总共 8 对供体）的 PBMC（80K/孔）。用多种浓度的抗 CTLA4 检查点抑制剂抗体处理细胞。HeatMap 中显示了 384 孔检测板上的 IFNγ分泌。针对 384 孔板的高速分析用时不超过 20 分钟。
细胞因子的多重定量
使用定制或预配置 panel 在单个样品中分析多达 30 种分泌蛋白的浓度。
图 2.使用 iQue® Forecyt® 软件系统快速方便地分析数据。
将树突细胞与编码的 CD4+T 细胞（T 细胞与 DC 的比率为 3:1）一同接种，并用帕博利珠单抗处理细胞，在第2天和第6天使用iQue®Qbeads®人炎症组合试剂盒进行分析。每个试剂盒都为所含分析物提供了预定义分析模板。(A) 用于根据 Qbeads 独特的荧光特征分离 Qbeads 的圈门模板。(B) 使用 Qbeads 在一个单孔中重复测量得到的多个炎性细胞因子的基线分泌情况。(C) 分泌蛋白质和细胞因子的 iQue® Forecyt® HeatMap 和浓度响应曲线有效地呈现出了清晰的数据趋势。
同时定量细胞因子和细胞读数
将 iQue® Qbeads® 与其他 iQue® 分析试剂盒和/或抗体结合使用，用于细胞功能和亚群的综合分析。
图 3. 分泌信号分子和细胞功能的多重定量。
使用 Dynabeads 或 CD3-CD19 BiTE（双特异性单链抗体）活化 T 细胞，除了测定同一孔内的细胞活力（使用 iQue® 细胞膜完整性分析试剂盒）外，还使用 iQue® Qbeads® Plexscreen 捕捉并分析了细胞因子的产生情况。与 Dynabeads 相比，经 BiTE 处理的 T 细胞产生的细胞因子水平较低，这与靶细胞杀伤增强相关。(A) HeatMap 显示了随着 T 细胞活化剂浓度的增加 TNFα 的分泌浓度变化。分别用 Dynabeads (B) 和 BiTE (C) 活化 T 细胞后，IFNγ 分泌的浓度响应曲线。使用 Dynabeads (D) 和 BiTE (E) 时的细胞活力。
最大程度地提高检测效率
减少试剂成本和获取结果的时间 - 只需使用 2 µL 即可，节省宝贵的样品，无需清洗步骤。
图 4. iQue® Qbeads® Plexscreen 分析试剂盒的工作流程。
(A) 使用 iQue® Qbeads® Plexscreen 测量分析物浓度的简单工作流程示意图。(B) iQue® Qbeads® assay builder 具有灵活的分析规格，可在一个单孔中分析多达 30 种分泌蛋白的浓度。(C) 准确识别 iQue® Qbeads® 和使用 iQue® Forecyt® 软件细胞群设门表征的细胞。
订购信息
iQue® Qbeads® PlexScreen: 人分泌蛋白
| 细胞因子 | |||
| 趋化因子 | TNF | 白介素 | |
CCL2 (MCP-1) | TNF (TNFα) | IL-1α | IL-10 |
CCL3 (MIP-1α) | sCD154（sCD40 配体） | IL-1β | IL-11 |
CCL5 (RANTES) | CD178 (Fas 配体) | IL-2 | IL-12/IL-23(p40) |
CCL11 (Eotaxin) | TNFβ (LT-α/TNFSF1) | IL-3 | IL-12(p70) |
CD14 | 90563 | IL-4 | IL-13 |
CXCL9 (MIG) | IL-5 | IL-17A | |
CXCL10 (IP-10) | IL-6 | IL-17F | |
CXCL11 (I-TAC) | IL-7 | IL-21 | |
CX3CL1 | IL-8 | IFN-α | |
IL-9 | IFN-γ | ||
受体 | 粘附分子 | 生长因子 | 酶 |
CD121a (IL-1 RI) | CD54 | 血管生成素 | 颗粒酶 A |
CD121b (IL-1 RII) | CD62E | Basic FGF | 颗粒酶 B |
TNFRI | CD62L | CSF2 (GM-CSF) | |
TNFRII | CD62P | CSF3 (G-CSF) | |
CD106 | VEGF | ||
iQue® Qbeads® PlexScreen: 小鼠分泌蛋白
| 细胞因子 | |||
| 趋化因子 | TNF | 白介素 | |
CCL2 (MCP-1) | TNF (TNFα) | IL-1α | IL-12/IL-23 (p40) |
CCL3 (MIP-1α) | IL-1β | IL-12(p70) | |
CCL4 (MIP-1β) | IL-2 | IL-13 | |
CCL5 (RANTES) | IL-3 | IL-17A | |
CXCL1 (KC;GROα) | IL-4 | IL-17F | |
CXCL9 (MIG) | IL-5 | IL-21 | |
IL-6 | IL-23 (p19/p40) | ||
IL-9 | IFN-γ | ||
IL-10 | |||
生长因子 | 粘附分子 | ||
CSF2 (GM-CSF) | CD62E (E-选择素) | ||
CSF3 (G-CSF) | CD62L (L-选择素) | ||
