免疫应答评估
病原体感染人体时会引发一系列复杂的免疫应答，其中涉及免疫系统的先天性和获得性应答通路。通过了解针对感染的免疫应答，我们可以更深入地理解到为什么有些人更容易出现感染和相关并发症。
COVID-19 让我们认识到，我们需要深入了解免疫系统不同组成部分之间的复杂相互作用，从而迅速开发出新的疫苗和治疗方法。
赛多利斯先进的细胞和蛋白质分析平台通过提供全面的、相关性更高的数据来加速新疫苗的发现和开发，从而帮助对抗病毒感染。数据涉及的关键免疫应答包括：
- 中和抗体
- T 细胞活化、记忆和耗竭
- 细胞因子分析
- 免疫细胞杀伤
- NETosis
- 疫苗滴度和效价
免疫应答类型
中和抗体
病原体感染人体时会引发一系列复杂的免疫应答，其中涉及免疫系统的先天性和获得性臂。通过了解针对感染的免疫应答，我们可以更深入地理解到为什么有些人更容易出现感染和相关并发症。
使用 iQue® 高通量流式细胞仪平台鉴定和分析中和抗体
鉴定和测定中和抗体与病毒蛋白质结合的亲和力和动力学。
iQue® SARS-CoV-2（IgG、IgM 和 IgA）试剂盒是一种基于微球的免疫分析试剂盒，能够同时检测人免疫系统针对病毒感染或接种疫苗产生的靶向 SARS-CoV-2 刺突蛋白 RBD 的 IgG、IgM 和 IgA 抗体。
图 1：iQue® SARS-CoV-2（IgG、IgM 和 IgA）试剂盒工作流程。操作步骤易于遵守，需要的样品很少（只需要一份 10 µL 的血浆/血清样品，至少稀释 100 倍）。
中和抗体开发中的 Octet® 生物层干涉分析工作流程 1
表位配对分析有助于鉴定出阻碍靶标抗原上相同表位结合的抗体，在 mAb 的鉴定和工程化中，有利于获得理想的动力学和亲和力特征。该分析格式也可以用于确定中和抗体和病毒受体在与宿主受体结合方面的竞争情况。
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中和抗体开发中的 Octet® 生物层干涉分析工作流程 2
借助实时动力学（结合和解离）和亲和力数据，您可以更自信、更迅速地挑选靶标结合先导候选物。结合活性测量还可用于确定蛋白质稳定性和活性，特别适用于疫苗抗原选择。
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赛多利斯免疫应答解决方案提供：
使用活细胞分析来定量寨卡病毒感染和登革热病毒感染的 Vero 细胞的实时增殖情况，细胞经过甲基巴多索隆或寨卡病毒中和抗血清处理。
通过组合表型和功能分析（包括 iQue® Qbeads® 试剂盒），可以在不同微球捕获特定蛋白质，从而更好地对一系列蛋白质、细胞因子、酶和生长因子进行多重定量。研究人员通过将 iQue® 平台与赛多利斯的基于微球的高灵敏度荧光免疫法结合使用，测量了 COVID-19 患者血浆和血清中的 SARS-CoV-2 特异性抗体水平和亚型。Dogan M, Kozhaya L, Placek L, et al.
SARS-CoV-2 specific antibody and neutralization assays reveal the wide range of humoral immune response to virus.
根据结合亲和力和动力学评估，我们可以在开发过程的早期选择最佳的疫苗和候选治疗药物。
B. Vogel 等人在研究中使用了 Octet® BLI 仪器，他们对 BNT 162b2 RNA 免疫后的受体亲和力进行表征，发现预融合 SARS-CoV-2 刺突 RNA 疫苗具有高度免疫原性，在动物中可预防肺部感染。
免疫应答产品的特色
iQue® SARS-CoV-2 (IgG, IgM and IgA) 试剂盒
iQue® SARS-CoV-2（IgG、IgM 和 IgA）试剂盒包含即用型试剂，通过应用于 iQue® VBR 平台，可在单孔中同时检测对 SARS-CoV-2 刺突蛋白受体结合域 (RBD) 具有特异性的人 IgG、IgM 和 IgA 抗体。
- 实时结合动力学和亲和力测定
- 测定纯化和粗制样品的相互作用
- 快速数据采集 - 可同时采集多达 96 个生物传感器的数据
Incucyte® 活细胞分析与免疫细胞杀伤试验
实时模拟体外免疫细胞和病毒感染细胞的动态相互作用。使用非侵入性、非破坏性平台分析细胞健康、表型、亚群和功能，为免疫细胞、抗体功能和杀伤提供新信息。
中和抗体开发中的 Octet® BLI 分析工作流程
表位配对分析有助于鉴定出阻碍靶标抗原上相同表位结合的抗体，在mAb的鉴定和工程化中，有利于获得理想的动力学和亲和力特征。
免疫应答常见问题解答
iQue® 自动化、高通量、先进的流式细胞仪平台让科学家能够快速进行多重蛋白质分析、免疫表型分析以及功能评估。该平台提供即用型试剂盒，包括 iQue® T 细胞表型分析试剂盒、用于细胞因子风暴评估的 Qbeads® 人炎症组合、用于 T 细胞激活、记忆、杀伤和耗竭以及细胞因子分析的试剂盒，用于更深入地表征每个样品中的宿主免疫应答。
Octet® BLI 系统提供了一种快速有效的蛋白质定量方法，因为其通量更高、样品制备要求更低且运行成本更低。Octet® 系统上运行的样品也是可回收的，因此研究人员可以保存宝贵的样品并将其重复用于其他实验。此外，Octet® 分析不受有色样品中的吸收干扰或混浊样品的光散射的影响，可用于测量细胞培养上清液、细胞裂解液和血清等粗基质中的分析物浓度。
iQue® 高通量流式细胞仪以及 Octet® BLI 系统已广泛用于体液免疫应答的测量和表征，即筛选与 COVID-19 患者的 SARS-CoV-2 蛋白结合的抗体。
Dogan, M., Kozhaya, L., Placek, L., Gunter, C., Yigit, M., Hardy, R., Plassmeyer, M., Coatney, P., Lillard, K., Bukhari, Z., Kleinberg, M., Hayes, C.,- Arditi, M., Klapper, E., Merin, N., Liang, B.T., Gupta, R., Alpan, O., & Unutmaz, D. (2021, Jan 29). SARS-CoV-2 specific antibody and neutralization assays reveal the wide range of the humoral immune response to virus. Commun Biol, 4(1), 129. https://doi.org/10.1038/s42003-021-01649-6 PMID: 33514825; PMCID: PMC7846565.
Zhang, G., Pomplun, S., Loftis, A.R., Loas, A., & Pentelute, B.L. (2020). The first-in-class peptide binder to the SARS-CoV-2 spike protein. bioRxiv, https://doi.org/10.1101/2020.03.19.999318
Wu, Y., Li, C., Xia, S., Tian, X., Kong, Y., Wang, Z., Gu, C., Zhang, R., Tu, C., Xie, Y., Yang, Z., Lu, L., Jiang, S., & Ying, T. (2020). Identification of Human Single-Domain Antibodies against SARS-CoV-2. Cell Host & Microbe, 27, 891–898. https://doi.org/10.1016/j.chom.2020.04.023
病毒诱导细胞死亡、细胞活力和细胞间融合分析等活细胞分析方法可以进行长时间的、实时的活细胞分析，提供免疫细胞之间的细胞和功能性相互作用、抗体应答和病原体的深入信息。研究人员使用从数名 COVID-19 恢复期供体分离得到的抗 SARS-CoV-2 抗体，通过 Incucyte® S3 活细胞成像分析系统监测了细胞死亡和细胞间融合。Mor., M., Werbner, M., Alter, J., Safra, M., Chomsky, E., Lee J.C., et al. (2021). Multi-clonal SARS-CoV-2 neutralization by antibodies isolated from severe COVID-19 convalescent donors. PLoS Pathog, 17(2), e1009165.
是的，您可以将 Incucyte® Annexin V 红色染料和 Incucyte® Cytotox 绿色试剂相结合进行多重测定，从而轻松区分细胞凋亡和 NETosis
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点播网络研讨会：流式细胞仪在传染病研究中的应用发展历程
我们的小组成员将为我们分享如何研究各个感染阶段以及各自的传染病研究方向。
