用于快速抗体和 His 标签蛋白纯化的亲和层析解决方案
亲和层析 （AC） 是生命科学实验室和生物制药行业纯化生物制剂的关键步骤。它特别适用于基于与亲和配体的特异性相互作用，单步减少抗体和 his 标签蛋白样品中的主要污染物。
对于筛选、制备纯化和其他研究应用，Sartobind®️ IDA 和我们的下一代Rapid A 膜层析滤器以即用型针头式过滤器形式提供，可减少工作流程步骤，更大限度地缩短设置时间，并确保简单、灵活和高选择性的纯化。
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亲和层析及其应用
亲和层析的原理
当细胞培养上清液等复杂混合物通过 Sartobind® Lab 膜层析滤器中的亲和层析膜时，对流分子传输可有效捕获目标分子 （MOI），同时宿主细胞蛋白 （HCP） 和 DNA 等杂质流过膜。在洗脱 MOI 之前，可以使用洗涤步骤来提高纯度。
上样前需要浓缩或缓冲液置换样品？
抗体纯化
Protein A 是一种来源于金黄色葡萄球菌的细菌细胞壁蛋白。它对免疫球蛋白 G 抗体（包括 mAb）的 Fc 区具有高亲和力。
当固定在层析基质上时，Protein A 能够从复杂混合物（如细胞培养上清液或血清样品）中选择性捕获抗体。该方法提供高纯度抗体样品，可用于从免疫测定到治疗性抗体生产的各种应用。
His 标签蛋白纯化
二价金属离子对组氨酸残基具有特别高的亲和力。在研究实验室中，重组蛋白通常在 N 端或 C 端带有多聚组氨酸标签，便于通过固定化金属亲和层析 （IMAC） 选择性捕获它们。
由于其重现性、选择性和温和的洗脱条件，该方法可以将纯化简化为单步工艺，生产纯天然蛋白质样品，为结构和功能研究做好准备。
亲和层析资源
常见问题解答
亲和层析基于生物分子与所选配体的特异性相互作用。它可用于抗体和其他含 Fc 的分子 （蛋白 A） 或用 his 标签 （IDA） 改造的蛋白质的捕获纯化。
Sartobind®️ IDA Lab 也可用于从环境样品中捕获或去除二价金属离子。
Sartobind® Lab 目前提供蛋白 A 或亚氨基二乙酸 （IDA） 配体。
亲和层析基于生物分子与所选配体的特异性相互作用。它可用于抗体 （Protein A） 或用 his 标签 （IDA） 改造的蛋白质的捕获纯化。
Sartobind® IDA Lab 也可用于从环境样品中捕获或去除二价金属离子。
一个或四个单元、一对鲁尔到 UNF 适配器和一个快速入门指南。
两个装置、一对鲁尔到 UNF 适配器和一个快速入门指南。
是的。虽然我们已采取措施，通过在产品包装中提供快速入门指南来更大限度地减少对环境的影响，但如果您需要有关如何使用我们产品的更多信息，可以从我们 eShop 的相关产品页面下载完整的说明手册。
两种膜层析装置均可在有或没有设备的情况下使用。注射 泵或蠕动泵 可直接连接到鲁尔锁入口，以更短的设置时间实现快速纯化。或者，包括一对适配器，以便与大多数液相色谱系统兼容。
柱床体积也称为膜体积 （MV）。
- Sartobind® Rapid A 实验室：0.5 mL
- Sartobind® IDA 实验室：2.1 mL
这些层析单元在大多数常见的纯化缓冲液中是稳定的。应避免使用氧化剂。
与填料色谱法不同，气泡不会破坏 Sartobind® 膜。这样就无需对缓冲液进行脱气，节省了大量的制备时间。
为了获得更优的生物分子捕获效果，我们建议使用与待纯化样品成分相似的缓冲液进行平衡。这是一个快速的过程，只需几秒钟的纯化周期。
尽管 Sartobind® 膜具有抗堵塞性，但我们建议在上样前对所有样品进行预过滤。为了更大限度地提高分析效率，可以将 Minisart® 针头式过滤器 连接到 Sartobind® Lab入口，以便同时进行预过滤和样品加载。
如果分子的最佳捕获条件未知，我们建议在膜上加载不同的金属离子进行筛选。建议的金属离子包括镍 （Ni2+）、钴 （Co2+）、铜 （Cu2+） 和锌 （Zn2+）。
也可以进行侦查纯化以确定最佳洗涤和洗脱条件。当通过离心机、注射器或泵进行纯化时，使用逐渐增加咪唑浓度的缓冲液进行多步洗脱。如果使用液相色谱系统，则应用线性洗脱梯度。然后，应使用适当的方法（例如 SDS PAGE）来分析流出液和洗脱液馏分，并确定哪些条件可提供所需的纯度水平。
每个 Sartobind® Lab 膜层析滤器都可以在适当的再生和储存下多次重复使用。为了保持 Sartobind® IDA Lab 单元的结合载量，建议定期剥离和重新加载螯合金属离子。
我们建议对每个目标生物分子使用单独的 Sartobind® Lab 膜层析滤器，以消除残留风险。
Sartobind® Rapid A Lab 已经具有每个循环 ≥17.5 mg 的高动态结合载量。
为了纯化更多的样品，可以串联运行两个单元。或者，您可以通过单个膜层析滤器充分利用高流速，在多个循环中用多个较小的负载纯化一个样品。
是的，有。Sartobind® Rapid A Lab 不仅与所有其他 Sartobind® Lab 膜层析滤器一样，使用 100% 可再生能源制造，而且能够重复使用多达 100 次循环，有可能减少您需要的耗材数量，从而减少研究浪费。此外，与其他Protein A 填料层析柱和膜层析滤器不同，Sartobind® Rapid A Lab 可以在室温下储存，从而减少了对能源密集型冷却的需求。
