用于通过离子交换 (IEX) 进行实验室规模生物分子纯化的灵活层析解决方案
离子交换 (IEX) 是一种重要的分离技术,广泛用于研究实验室和生物制药行业。建议根据不同分子的净电荷,将它们用于各种生物分子的纯化和精纯,包括抗体、其他蛋白质、核酸和病毒等。
Sartobind® IEX 膜层析滤器有多种即用型形式可供选择,可更大限度地缩短蛋白纯化实验和其他生物分子实验中过滤的设置时间。
实验室规模 IEX 层析产品
IEX 实验室规模纯化的主要考虑因素
阴离子和阳离子交换配基应分别用于捕获带净负电荷或正电荷的分子。
离子交换缓冲液
应选择 IEX 的纯化缓冲液,以确保目标生物分子的稳定性。对于仅在高于或低于其 pI 的 pH 值下稳定的分子,这也就决定了您需要使用的配基类型(分别为 AEX 或 CEX)。如果稳定性不重要(例如,您的蛋白质变性并在纯化后会重新折叠)或分子在其 pI 两侧的较宽 pH 范围内保持稳定,则应根据您的偏好选择 AEX 或 CEX 缓冲液。
需要一些指导或 IEX 缓冲液建议吗?
IEX 纯化缓冲液应确保生物分子的稳定性,并适合所选的膜层析化学配基。
实验室 IEX 资源
常见问题解答
离子交换膜层析是一种分离技术,它使用离子交换配体根据净电荷的微小差异来纯化生物分子。它的工作原理与柱层析类似,但离子交换配体偶联到由大孔膜而不是微孔树脂组成的固定相上。这样可以更快地纯化和提高带电分子(如抗体、其他蛋白质、肽、核酸和病毒)的产量。
Sartobind® IEX Lab 和 Vivapure® IEX 均提供季铵 (Q) 和二乙胺 (D) 阴离子交换剂或磺酸 (S) 阳离子交换剂。
离子交换广泛适用于许多目标分子。它可用于抗体、其他蛋白质、核酸和病毒的捕获纯化或流通精纯,基于其独特的净电荷。还推荐使用离子交换层析法去除聚集体、宿主细胞蛋白 (HCP) 和 DNA,以及清除病毒和内毒素。
一个、两个或四个单元、一对鲁尔到 UNF 适配器和一份快速入门指南。
8 个或 24 个单位、16 或 48 个流通管和洗脱液收集管以及快速入门指南。
是的。虽然我们已采取措施,通过在产品包装中提供快速入门指南来更大限度地减少对环境的影响,但如果您需要有关如何使用我们产品的更多信息,可以从我们 eShop 的相关产品页面下载完整的说明手册。
柱床体积也称为膜体积 (MV)。有多种柱床体积可供选择,以适应一系列筛选和制备纯化应用:
- Vivapure® IEX 迷你型:0.24 mL
- Vivapure® IEX Maxi:2.7 毫升
- Sartobind® IEX 实验室:0.41、2.1 或 2.8 mL
这些层析单元在大多数常见的纯化缓冲液中是稳定的。应避免使用氧化剂。有关 pH 兼容性的更多信息(因化学成分和暴露时间而异),请参阅说明手册。
与填料层析法不同,气泡不会破坏 Sartobind® 膜。这样就无需对缓冲液进行脱气,节省了大量的制备时间。
为了获得更优的生物分子捕获效果,我们建议使用与待纯化样品成分相似的缓冲液进行平衡。这是一个快速的过程,只需几秒钟的纯化周期。
尽管 Sartobind® 膜具有抗堵塞性,但我们建议在上样前对所有样品进行预过滤。为了更大限度地提高分析效率,可以将 Minisart® 针头式过滤器 连接到 Sartobind® IEX Lab 进样口,以便同时进行预过滤和样品加载。
使用 Vivapure® IEX 纯化的小体积样品可以使用 Vivaclear 离心过滤器 或 Minisart® 针式过滤器快速预过滤。
应进行侦查纯化以确定更优捕获和洗脱条件。当通过离心机、注射器或泵进行纯化时,使用离子强度逐渐增加的缓冲液进行多步洗脱。如果使用液相色谱系统,则应用线性洗脱梯度。然后,应使用适当的方法(例如 SDS PAGE)来分析流出液和洗脱液馏分,并确定哪些条件可提供所需的纯度水平。
应针对每种生物分子优化纯化方法,考虑缓冲液 pH 值和电导率以及目标的等电点 (pI) 等特性。如果优化后结合载量仍然不足,可以串联使用 2 至 4 个 Sartobind® IEX Lab 。或者,您可以利用高流速,在单个装置上通过多个循环纯化具有多个较小负载的样品。
虽然 Vivapure® IEX 专为一次性使用而设计,但每个 Sartobind® IEX Lab 都可以多次重复使用。通过适当的再生和储存,结合载量可以维持至少 100 个循环。
我们建议对每个目标生物分子使用单独的 Sartobind® IEX Lab ,以消除残留风险。