小胶质细胞的表征
神经免疫学是一门研究发育期间、体内稳态和损伤或感染反应期间神经和免疫系统相互作用的学科。免疫细胞在神经元网络的调节中具有至关重要的意义，例如小胶质细胞的突触修剪是神经可塑性的重要组成部分。损伤、感染或内稳态失衡可导致神经炎症和小胶质细胞活化，进而吞噬死亡或正在死亡的神经元和感染因子。慢性神经炎症被认为是许多神经退行性疾病（如阿尔兹海默症）的诱因，因此小胶质细胞的长期活化会危及神经元网络。
Incucyte® 活细胞分析系统能对小胶质细胞进行各类形态学和功能表征。其全自动化图像采集和分析有助于对凋亡神经元的小胶质细胞胞葬作用或生物颗粒吞噬作用进行可视化和动力学分析。小胶质细胞在趋化细胞因子作用下的迁移可以通过活细胞趋化迁移和侵袭实验进行可视化和量化。无干扰型试剂可以维持细胞形态不受终点分析的干扰和限制，因而能直接以 96 和 384 孔的通量从培养箱中不间断培养的每个细胞中收集更多数据。
介绍神经免疫功能的Incucyte®分析方法
关键优势
观察并验证小胶质细胞的吞噬
- 通过用 pH 敏感的荧光探针获取的图像和视频观察小胶质细胞的吞噬情况。
- 该方法适用于凋亡细胞、细胞碎片、蛋白质聚集体和生物颗粒的吞噬作用。
图 1.观察并验证小胶质细胞的吞噬。iPSC 源小胶质细胞 (Axol BioSciences) 吞噬 pHrodo 橙色标记的凋亡 Neuro2A 细胞的延时可视化。 图像验证了凋亡的靶细胞进入小胶质细胞的细胞质的过程。 Neuro2A 靶细胞用 Incucyte® pHrodo 橙色细胞标记试剂盒标记，并用十字孢碱诱导凋亡。
对小胶质细胞吞噬和胞葬作用进行实时量化
自动分离由 Incucyte® pHrodo® 橙色试剂发出的荧光信号
结合 Incucyte® pHrodo 橙色细胞标记试剂盒，实时分析凋亡的 Neuro2A 细胞或 β 淀粉样蛋白聚合体的吞噬反应
评估吞噬调节剂的作用机制
图 2.对小胶质细胞吞噬作用进行实时量化。iPSC 源小胶质细胞 (Axol Bioscience) 吞噬 pHrodo 标记的凋亡神经元 (Neuro-2A) 的代表性荧光图像。当靶细胞内化为酸性吞噬体时，观察到细胞内橙色荧光增加；青色轮廓为分光遮片。pHrodo 标记的 Neuro2A 细胞的胞葬作用依赖于细胞数量。pHrodo 标记的 Aβ 聚集体的吞噬作用依赖于时间和浓度。
图 3.吞噬调节机制的评价。BV-2 效应细胞胞葬凋亡的 Neuro2A 细胞（左图）或大肠杆菌生物颗粒（中间图）。细胞松弛素 D（上图）对胞葬作用和吞噬作用均有浓度依赖性抑制作用， IC50 值分别为 0.16 µM 和 1.5 µM。相比之下，西仑吉肽（一种 aVb3 和 aVb5 整合素的抑制剂）选择性地减弱了胞葬作用（IC50 值为 0.17 µM），且在实验的最高浓度 (100 µM) 下对吞噬作用几乎或没有影响。这些数据支持了整合素在胞葬作用所需的细胞相互作用中发挥其功能，而不是细菌的吞噬作用。
评估小胶质细胞的趋化性和迁移
用图像和视频观察小胶质细胞的趋化性
每个 96 孔趋化板仅需 1,000 至 5,000 个细胞，适用于数量少且昂贵的原代细胞群
图 4.评估小胶质细胞的趋化性和迁移。Incucyte® ClearView 板上 iPSC 源小胶质细胞 (CDI) 的图像。孔隙如蓝圈所示（左图）。小胶质细胞向补体成分 5a (C5a) 的迁移有时间和浓度依赖性。
监测分化或活化后的形态变化
追踪单核细胞向小胶质细胞分化过程中的形态变化
图 5.iPSC 源单核细胞 (Axol BioScience) 分化为小胶质细胞的形态学变化展示。注意小胶质细胞的外观变化。 12 天后，红色箭头所示为分支状细胞，而黄色箭头所示为较大的扁平变形虫样细胞。14 天内每隔 2 天给予细胞分化培养基，每 6 小时采集 20 倍放大的时相图。
订购信息
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应用 | 说明 | 商品目录号 |
|---|---|---|
吞噬作用 | ||
Incucyte® pHrodo® 橙色细胞标记试剂盒，适用于吞噬作用 | 1 盒 | 4766 |
Incucyte® pHordo® 红色细胞标记试剂盒 | 1 盒 | 4649 |
趋化作用 | ||
Incucyte® 趋化分析软件模块 | 1 个模块 | 9600-0015 |
Incucyte® ClearView 96孔趋化板 | 1 块板 | 4582 |
Incucyte® ClearView 96孔趋化板 – 10 块装 | 10 块板 | 4648 |
所有应用 | ||
Incucyte® SX5 活细胞分析系统 包括图像采集与分析系统：
| 1 套系统 | 4816 |
