使用活细胞成像和分析最大程度地洞察类器官分析结果
人类疾病研究的进步，特别是再生医学和精准疗法，源于使用体外 3D 细胞培养模型的开创性工作。这些先进的细胞模型与体内病理生理环境中细胞的结构、形态发生和功能特性相似，为预测和转译研究构建了复杂的细胞模型。然而，为了建立和加速类器官与临床成果的相关性研究，需要能够减少差异性，同时提高洞察力的方法。 离体培养人体模型方面的创新开辟了充斥着无限可能的科学领域，但仍受限于表征此类复杂细胞模型的技术。
- 由于缺乏环境控制，以及采用了不合适的 3D 细胞培养方案，常规技术可能会引入差异，对类器官细胞的健康造成影响
- 低通量且无法扩大筛选
- 类器官细胞生长、死亡或形态的主观随机性评估
- 类器官成像的采集涉及到耗时、昂贵的手动操作过程
- 需要第三方软件进行终点分析，或需要额外的荧光标记，因此定量的信息有限
Incucyte® 类器官分析方案解决了 3D 类器官培养工作流程的难题，通过整合优化的分析方案和软件解决方案，实现实时的无标记分析，支持生理相关条件下对类器官进行高效、可靠的多参数监测。使用 Incucyte® 类器官分析软件模块轻松推进类器官研究和新疗法开发。
类器官检分析解决方案
Incucyte® 类器官分析概述
通过非标记的长时程图像采集和分析评估 3D 细胞培养模型中的相关数据。Incucyte® 类器官分析采用经过验证的方案和 Incucyte® 类器官分析软件模块，兼容使用微孔板规格连续采集和客观分析类器官的尺寸、计数和形态。Incucyte® 类器官工作流程支持通过两种不同的方法进行类器官研究：
- 全新方案！在 Incucyte® 3D 细胞微孔板中接种、培养和分析类器官（需要 v2024A 或更高版本的软件）
- 接种类器官至Matrigel®
在培养箱中追踪类器官随时间的变化并自动进行标准化分析，从而生成可重复、生理相关的长时程监测数据。
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产品 |
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| Incucyte® 类器官分析软件模块 （模块可用于 Incucyte® SX5、S3、SX1 活细胞分析系统） |
| Incucyte® SX5 活细胞分析系统 |
关键优势
示例数据 - 类器官检测
通过简单、高通量的类器官形成和评估提高效率
图 1.Incucyte® 3D 细胞微孔板专为支持高通量类器官研究而设计，适用于发育生物学、疾病模型和药物发现。这款孔板采用水凝胶打印微孔，配有独特的移液口，可实现均匀的类器官形成和自动化培养，从而提高大规模实验的效率和可重复性。
自动定位和分析类器官，深入了解形态、大小和数量
图2. 使用 Incucyte® 实时活细胞成像分析系统动态监测不同的类器官表型。将小鼠肠道类器官以单细胞悬液形式（200 个细胞/微孔）接种到 500 µm Incucyte® 3D 细胞微孔板中。接种后第 0 天至第10天的明场视频展示了类器官的形成、生长和成熟。
图 3. 将小鼠肠道、肝脏和健康人大脑的类器官（50% Matrigel®）接种到 96 孔板中，并在 Incucyte® 中成像。接种后 3 天拍摄的明场视频和图像显示了 3D 细胞培养物中特定细胞类型的形态和生长特征。
通过非标记分析，定量分析类器官的生长/死亡
图 4. 类器官的自动非标记定量分析。明场图像展示了在Incucyte® 3D 细胞微孔板中生长的小鼠肠道类器官（200 个细胞/微孔），使用十字孢碱 (1 µM, STP),、喜树碱 (1 µM, CPT)、环己酰亚胺 (10 µM, CHX) 和 5-FU (100 µM) 分别处理 5 天的结果。总类器官面积和灰度的图像和时间进程数据展示了多种化合物和控制条件随时间变化对类器官带来的影响。
图 5. 测量化合物处理后类器官形态特征的变化。明场图像显示了肝脏类器官（1000个细胞/孔）添加或未添加蛋白激酶抑制剂十字孢碱 (1 µM, STP) 处理的结果。溶媒处理的类器官尺寸增大，数量有所增加，而在添加了 STP 的情况下，可观察到类器官尺寸明显减小，数量显著降低。图像（放大后）和时程数据还表明，在添加 STP 的情况下，类器官会失去其特征性的圆形表型（偏心度增加），且暗度会随时间增加。
