类器官培养 QC 概述
体外 3D 细胞培养，特别是人体类器官培养，为转化疾病研究或建模、再生医学和预测性精确疗法开辟了全新的视角。目前的技术已支持在体外生成各种干细胞 (SC) 分化的器官细胞类型，用于模拟复杂的组织，同时保持基因组的稳定性和对药物处理的反应性。
因此，相比传统的 2D 培养物，类器官具有明显的优势，且在各种创新应用方面具有空前的潜力。常规的类器官工作流程包括多个步骤；首先将干细胞从特定的器官/组织中分离出来，在 3D 类器官培养系统中培养、分化，然后对这些培养物进行处理（例如基因操作、标记等），最后将其用于下游分析（类器官工作流程图）。为了将这些模型应用于有意义的基础研究、疾病建模或药物筛选，需要采用特定且可靠的培养和分析方法，包括从培养质量控制开始的整个类器官工作流程中每个步骤的严格控制、优化和记录。
目前，类器官培养物的表征和优化受限于生长过程中形成 3D 细胞模型的可重现性及其监测。
- 缺乏经过验证的方案，以实现类器官形成的孔间可重现性，且数据通量较低
- 类器官图像的采集涉及到耗时的手动操作过程
- 需要借助第三方软件的分析，且定量的信息有限
- 在采集类器官图像期间无法控制环境，可能会导致分析结果差异
Incucyte® 类器官培养 QC 应用是一套完整的解决方案，由经过验证的 3D 细胞培养方案和相应的软件模块组成，可实现分析对象的实时可视化和无标记定量分析，优化了类器官的培养条件。
应用
Incucyte® 类器官培养 QC 应用
对多个组织样本进行数天、数周或数月的活细胞成像和分析，生成标准化且可重现的类器官数据。
利用成熟的方案和集成式分析加速类器官发现，为下游分析制备提供可重现的培养技术。 类器官培养 QC 应用可在生理相关环境中使用 Incucyte® 类器官分析软件模块和 Incucyte® 活细胞分析系统对 Matrigel® 液滴中的类器官大小、计数和形态进行直接的无标记分析。
Incucyte® 类器官工作流程
Incucyte® 类器官分析软件模块可提供自动化、无标记的分析方案，用于优化 24 或 48 孔板（Incucyte® 类器官培养 QC 应用）中的类器官培养条件，并在 96 孔板规格的分析中定量分析类器官的生长和死亡（Incucyte® 类器官分析）。
关键优势
Incucyte® 类器官分析的关键优势
- 类器官自动定位和分析 - 在生理相关环境中自动可视化和定量嵌入 Matrigel® 液滴内的类器官。
- 类器官形成的动力学表征 - 使用 Incucyte® 类器官分析软件模块获得连续、无标记的数据，以优化培养条件。
- 确定类器官培养的成熟阶段 - 根据综合形态学指标，定义类器官传代或培养扩展的理想周期。
- 提高分析效率- 采用成熟的方案和类器官实时集成分析，开启您的科学发现。
类器官自动定位和分析
在组织培养箱的稳定环境中自动定位和定量分析类器官的分化和成熟情况，实现自动化的类器官 QC 工作流程。
图 1. 对培养箱内 Matrigel® 液滴中的类器官分化和生长进行无干扰的动态监测和定量分析。将小鼠肠道和小鼠胰腺类器官嵌入 24 孔板内的 Matrigel® 液滴中（分别为 50% 或 100% Matrigel®），并在 6-8 天内通过 Incucyte® 成像。明场视频（接种后 2 天）和明场区域的时程曲线分别显示了细胞类型特异性类器官的分化、形态和生长。
使用实时动力学测定表征类器官的形成
Incucyte® 类器官分析软件模块可在数周或数月内自动分析整个 Matrigel® 液滴中类器官的大小和计数，以优化培养条件。
图 2. 使用明场大小的测量区分最大培养扩展的适宜条件。小鼠肝脏类器官以多种接种密度嵌入 48 孔板内的 Matrigel 液滴中 (100%)。类器官的成像（接种后 5 天）和时程曲线表明，类器官的大小和生长速度与细胞数量成正比。
确定类器官培养的成熟阶段
通过客观评估类器官形态，深入洞察传代或扩展培养的最佳时期。
图 3. 使用综合形态指标定义细胞类型特定的传代频率。通过出芽和管腔内碎片积聚等成熟指标确定肠道类器官的传代频率。使用 Incucyte® 的偏心率（出芽）或暗度（碎片堆积）标准对这些指标进行动态定量。
提高分析效率
通过经验证的方案和集成式软件，可在 24 或 48 孔板的 Matrigel® 液滴中的形成可重现的类器官并可对其进行分析。
图 4. 经实验室测试的 Incucyte® Matrigel 液滴类器官培养方案。轻松培养、扩展和维持嵌入 Matrigel 液滴中的类器官培养物，显示器官特定的生理学信息。
图 5. 向导式界面，即使初次使用的用户也能够轻松操作。自动图像采集和分析工具可为您带来“轻松设置，自动化处理”的体验。远程观察 24 或 48 孔板中类器官的分化和生长情况，实时分析和监控实验进度。
订购信息
订购信息
产品 | 数量 | 产品目录号 |
|---|---|---|
Incucyte® 类器官分析软件模块 （适用于 Incucyte® SX5、S3、SX1 活细胞分析系统） | 1 个模块 | 9600-0034-A00 |
