用于非标记生物分子相互作用分析的生物层干涉技术(BLI)
20 多年来,我们通过创建成熟的无流路生物层干涉 (BLI) 系统、耗材和软件,为客户提供了可靠的支持。我们的产品受到来自世界各地科学家的青睐,为他们在生物分子相互作用分析领域的研发需求提供支持,涵盖范围包括药物研发、抗体工程、生物工艺和质量控制 (QC)。
我们获得了良好的市场口碑及用户反馈, 体现在3,500 多台安装的客户基础上,并且在超过 7,000 篇客户出版物中留下深深的足迹。多年来,我们的第一要务始终是提供非凡的技术和科学支持,确保您能够快速有效地利用我们的产品来实现您的实验目标。
Octet® 在我们的未来蓝图里占据重要地位,该系统率先将行业领先的非标记技术-生物层干涉(BLI)和表面等离子共振 (SPR) 相结合,通过实时非标记技术检测结合动力学和亲和力,以确定分析物的浓度及结合活性。
隆重介绍:Octet®BLI 解决方案
提供性能出色、灵活可靠,助力实时、非标记且高质量的结合动力学和定量分析
Octet® BLI 系统为蛋白-蛋白和蛋白-小分子互作分析提供了一种无流路、快速且高通量的可靠方法。Octet® BLI 平台可以直接检测特定的蛋白或药物分子,即使是复杂的混合物和未纯化的样品也可以轻松检测,如细胞培养上清液和裂解物。
让货真价实的 Octet® 平台为您的研究赋能,助您加快产品上市、缩短项目周期并且提升项目能力。
生物层干涉(BLI)仪器
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20 年专业的 BLI 知识
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看看 Octet® BLI 的用户是怎么说的
全球数以千计的研究人员在药物发现、生物制药开发和学术研究等不同领域使用 Octet® 系统,进行实时分析结合特异性、活性分析物浓度、亲和力或结合动力学。看看用户如何评价Octet® BLI 这一不可或缺的工具,帮助他们推进研究、加快新疗法和诊断开发。
Octet® 性能:灵敏、免清洗且可重复的数据
基线稳定性、低信噪比和低基线漂移是高质量数据的关键
Octet® R 系列为生物分子分析提供了一种先进的、无流路的方法,配备多种现成生物传感器,可用于快速结合动力学和定量分析。这些系统利用了赛多利斯货真价实的非标记生物层干涉 (BLI) 技术,能够直接检测特定的蛋白和其他生物分子 —— 即使是粗细胞培养上清液和裂解物这样的复杂混合物也能从容应对。
Octet® BLI 系统通过实时监测结合事件,计算结合速率 (ka)、解离速率 (kd) 和亲和常数 (KD)。该系统具有优越的灵敏度,能够测量分子量低至 150 Da 的小分子。以下示例显示了小分子相互作用的动力学分析。
图 1. 配体生物素化碳酸酐酶与小分子分析物呋塞米 (330.7 Da) 之间的动力学分析,在 Octet® R8 系统上使用 超级链霉亲和素 (SSA) 生物传感器进行,分析条件为 1000 rpm 和 25 ℃。制备呋塞米样本溶液,分别以 0.1、0.3、1.0、3.0、10.0 µM (n=4) 的浓度制备连续稀释溶液。采用 1:1 结合模型处理数据并拟合曲线。
以高分辨率和低信噪比测量高亲和力相互作用
缓慢解离速率显示解离步骤中信号变化极小,需要结合稳定基线和低基线漂移以准确测量解离。
此外,捕获可测量的相互作用解离过程可能需要数小时 (> 2h) 的数据采集,尤其是对于高亲和力相互作用,通常具备缓慢的解离速率。因此,测量较长的解离时间对于测量高亲和力相互作用也至关重要。
Octet® R8 系统可在单次无人值守运行中同时测量多达 8 份样本。结合独有的防蒸发盖,通过尽量减少蒸发保持样品完整,可以让科学家借助长达 12 小时的蒸发控制收集准确的测量值。
使用Octet®R8进行缓慢解离过程的高亲和力相互作用检测,重复三次测定结果如下。抗体-抗原相互作用的完整动力学表征运行 3 次,总运行时间为 11 小时。
图 2 和图 3 分别为长时间解离测量的两个示例,该测量长达几个小时,旨在检测非常缓慢的解离速率。
生物层干涉技术(BLI)的应用
Octet® 非标记 BLI 系统的应用
结合动力学
- 蛋白质-蛋白质相互作用
- 抗体表征
- 抗体-抗原结合
- 蛋白质-小分子相互作用
- DNA-适配体结合
- 细菌-抗体相互作用
- 类病毒颗粒-抗体/蛋白质结合
- 表位分型
- GPCR-蛋白质结合
- 解离速率排名
- 亲和力成熟
定量分析
- 抗体定量
- 蛋白质定量
- AAV滴度
- 糖基化分析
- ELISA替代
- 粗提物中的蛋白质定量
- 污染物检测
- 表达监测
- 免疫原性
- 疫苗诱导的抗体反应
- 效力测定
筛选
- 结合物筛选(杂交瘤、PAGE或裂解物)
- DNA适配体筛选
- 二次筛选和命中验证
- 抑制剂筛选
- 克隆选择
测定开发
- 配方开发
- 培养基开发
- 细胞系开发
- 细胞系优化
- 侧向流动测定验证
特色 BLI 资源
Octet® BLI 产品为受监管环境下的用户提供可靠支持
不仅仅是 GxP 合规工具——更是一套综合工具箱
赛多利斯针对从抗体定量、配体结合表征到效价测定的多项应用提供了广泛的 GxP 合规工具,用户可以使用这些工具在货真价实的 Octet® BLI 平台上开发经过验证的测定方法。
美国药典 (USP) 最近发布了新的通则<1108>,该通则首次引用了生物层干涉法在关键配体结合应用中的使用,该方法提供了更精确的动力学数据,并且可以测量相对广泛的结合亲和力。
赛多利斯提供 Octet® 21 CFR Part 11 软件和全系列 GxP 产品和服务,作为 Octet® GxP 工具包的一部分一并交付,并且还包括我们的生物传感器验证支持服务。
Octet® BLI 用户可以借助该服务在检测和验证期间对多个批次的生物传感器进行检测,并保留一个经过充分表征的批次用于购买。客户最多可以订购 5 个不同批次的生物传感器,每批最多 20 盒用于评价,并预留 40 盒该批次的传感器用于未来购买。
Octet®️ BLI 数据帮助药物在监管审批过程中获批
Octet®️ BLI 检测有助于识别潜在的安全性问题,提高药物评估的准确性。以下是辉瑞、阿斯利康、罗氏等公司利用该检测方法生成数据的几个案例,这些数据已作为药物获批的一部分支持信息提交给 FDA 或 EMA 等监管机构。
常见问答
生物层干涉 (BLI) 是一种测量生物分子相互作用的非标记技术。它是一种光学分析技术,因具有实时、高通量的分析能力,在生物化学、生物学和医学研究领域得到广泛应用。
生物层干涉 (BLI) 是一种非标记分析技术,常用于研究生物分子相互作用。这项技术所依据的原理是光学干涉,即生物传感器尖端上构建的生物层厚度发生变化,从生物层反射的白光干涉图样也会随之发生变化。干涉图样的变化与生物层厚度的实时变化相关,从而可以监测分子的结合和解离。
BLI 特别适用于在不需要荧光或放射性标记的情况下,提供有关分析物浓度、结合动力学、结合亲和力和生物分子相互作用特异性的定量数据。因此,这项技术成为药物开发、抗体检测和蛋白质分析等各个领域的热门选择。
在 BLI 中,生物传感器尖端浸入含有生物分子的溶液,这些分子与生物传感器结合,形成一层薄薄的生物层。随着越来越多的分子与生物传感器结合,干涉图样发生变化,反射光的波长也随之发生变化。通过监测这种变化,科学家就可以实时追踪结合过程,以便测量结合速率 (ka) 和解离速率 (kd),以及相互作用的结合亲和力 (KD),从而深入了解多种分子的生物分子相互作用。
与其他生物分子结合分析方法(如表面等离子共振 (SPR) 和酶联免疫吸附测定 (ELISA))相比,生物层干涉 (BLI) 具有多项优势。以下是一些主要优势:
- BLI 是一种非标记技术,避免了标记带来的潜在干扰,从而可以分析未修饰的生物分子。
- BLI 可实时分析生物分子相互作用,包括结合动力学、亲和力和浓度。
- 兼容多种样品类型:BLI 可用于多种样品类型,包括粗制样品或复合物基质中的样品,且不会产生明显干扰
- 只需要很少或者根本不需要样品制备,这有利于高通量筛选。
- 应用范围广泛:BLI 可用于研究各种相互作用,包括蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA/RNA、蛋白质-小分子,甚至还可以用于研究基于细胞的相互作用。这种多功能性使其可应用于许多研究和开发环境。
- 样品消耗少:BLI 通常只需要少量样品并且支持重复利用,这在处理珍贵或有限的材料时非常有利。
- 简便易用高通量:BLI 仪器通常简便易用,方便用户操作,并且能够同时处理多个样品,适用于高通量筛选应用。
- 成本效益:与其他一些技术相比,BLI 更具成本效益,尤其是在试剂使用和设备维护方面。
生物层干涉 (BLI) 在生物医学研究、药物发现和诊断开发等各个领域具有巨大潜力。这是一种非常高效的工具,支持抗体表征和研究蛋白质与小分子之间的相互作用,对于治疗开发有极大的帮助。
BLI 可用于生物仿制药生产、疫苗功效评估和蛋白质治疗药物的质量控制。它还有利于通过配体和受体、核酸和蛋白质之间的相互作用研究细胞信号传导和基因调控。在生物制药行业,BLI 在确保质量控制方面可以发挥关键作用,并有助于开发用于检测疾病生物标志物的诊断工具,凸显出这项技术在生命科学领域的广泛应用。
BLI 生物传感器采用干涉原理,利用白光源发射各种波长的光。传感器尖端生物表面顶部反射的光与内部参考层反射的光之间互相干扰,从而产生干涉图样。使用检测器(通常是光谱仪或光电探测器)捕获所产生的图样,用于测量干扰信号的变化。干涉图样的变化与传感器表面发生的生物分子相互作用直接相关。
生物层干涉是一种功能强大又多样的技术,为研究生物分子相互作用提供了有价值的工具。它能够提供实时、非标记分析,是促进生物化学、生物学和医学研究理解的宝贵工具,在新药和新疗法的开发中起到关键作用。