双特异性抗体 (BsAbs)
双特异性抗体 (BsAbs) 药物研发是一类创新的大分子药物研发,设计有两个结合位点,可同时靶向两种不同的抗原或同一抗原上的两个不同表位。目前正在探索将更多的 BsAb 应用于癌症治疗以及其他非肿瘤学适应症,如自身免疫性疾病、传染性疾病和其他疾病。
与传统的单克隆抗体相比,BsAb 因具有双重靶向结合能力和多种适应症的广泛应用,能够提供更强的细胞毒性作用。
FDA 批准的 BsAb 和临床流程中的候选 BsAb 有不同的形式,并通过不同的分子机制介导其治疗功能。
常见的 bsAb 形式包括基于单链可变片段 (scFv) 的 BsAbs、串联式 scFvs、CrossMab、DART(双亲和力重靶向抗体)和 Triomabs(可以结合两种不同抗原并与 T 细胞结合的三官能团抗体)。双特异性 T 细胞单链抗体 (BiTE) 可连接两个与癌细胞和 T 细胞结合的 scFv。
由于 BsAb 的形式多样,因此对其进行彻底表征以确保其安全性和有效性具有挑战性,包括对其药代动力学、药效学、免疫原性和潜在毒性的详细分析。
赛多利斯采用先进的分析技术来解决这些挑战,确保开发出具有理想质量和特异性的 BsAb。
双特异性抗体的研发流程
专为双特异性抗体 (BsAbs) 研发打造的特色产品
Octet® 非标记分子互作分析平台
Octet® 使用生物层干涉 (BLI) 技术,并行测量各类生物分子间的相互作用,无需使用检测试剂。
高通量 Octet® RH96 系统可大幅减少双特异性疗法检测开发所需的时间、精力和成本:
探索生物层干涉 (BLI) 技术 阅读案例分享
- 实时 BsAb 抗原结合动力学及滴度测定
- 亲和力及结合动力学的表征
- 快速筛选细胞株并鉴定具有较高浓度双特异性抗体的细胞池和克隆
iQue® 高通量流式细胞仪平台
iQue® 高通量流式细胞仪是一种高通量的悬浮细胞和微球分析平台,可用于不同抗体形式的多属性筛选。它是在单孔中进行细胞表型和功能分析的首选平台,可提供有助于简化工作流程和缩短结果获取时间的功能。iQue® 21 CFR Part 11 软件模块可确保分析从研究实验室轻松过渡到受监管实验室。
评估不同类型双特异性抗体(如CD3xCD19 双特异性 T 细胞单链抗体 (BiTE))的作用机制,并识别肿瘤微环境中的时间变化。
探索如何使用 iQue® 定量双特异性抗体触发细胞内吞的能力,这是抗体通过转铁蛋白受体 (TfR) 有效进行胞吞的必备能力。
- 抗体内化
- 抗体介导的 T 细胞活化
- T 细胞亚群、活化标记物的分析
- 细胞因子分析
- 靶细胞毒性评估
Incucyte® 活细胞成像分析系统
Incucyte® 活细胞分析系统经过精心设计,可有效捕获培养箱中发生的细胞变化。它可以对多种细胞类型和细胞相互作用(如免疫细胞活化、细胞健康和增殖)进行深入的功能和表型评估。
Incucyte® 21 CFR Part 11 软件模块提供全面的安全保护以及电子记录保存功能。
- 免疫细胞和肿瘤细胞的形态和空间分析
- 免疫细胞诱导的细胞毒性 — 免疫细胞杀伤
- 定量靶细胞和效应细胞数量
- 细胞增殖、健康、凋亡
- 抗体内化
了解 Incucyte Caspase-3/7 检测如何在 T 细胞依赖性双特异性抗体(如抗 HER2/CD3-TDB)的开发过程中进行实时、全自动的细胞凋亡测量。
CellCelector 全自动无损细胞分离系统
CellCelector Flex 是一款独特的全自动细胞成像和挑取平台,将高内涵成像系统与全自动细胞挑取平台相结合,可以并行处理数千个细胞以识别并筛选理想克隆。
在分子和细胞株开发期间,CellCelector Flex 可用于:
- 分离并克隆产生 BsAbs 的特定细胞株
- 通过强大的成像和分析功能确保单克隆性
- 扫描并筛选产生 BsAbs 的 CHO 克隆
- 使用纳米孔板技术在很小的空间内培养克隆
Picus® 2 电动移液器
赛多利斯双特异性抗体 (BsAbs) 解决方案具有以下优势:
开发的 BLI 方法可用于 BsAb 结合和 ProA 滴度测量,提供了一种简单的筛选方法和工作流程,具有通用、非标记且易于使用的特点,可评估 BsAb 相互作用。
将 Incucyte® 和 iQue® 分析整合在单个微孔板中,实现更明智的实验设计、机制洞察并快速获得可操作的结果。使用免疫细胞杀伤模型证明了 iQue® 和 Incucyte® 工作流程的兼容性。一旦通过 Incucyte® 活细胞分析观察到最大杀伤效果,即可制备细胞悬液并使用 iQue®T 细胞活化试剂盒进行评估,以识别 T 细胞亚群。
iQue® 平台的微量样品要求使其能够在无干扰情况下重复采集样品。研究结果表明,使用改良过的微量化 iQue® 检测方案,可以使样品和检测试剂的用量仅为原来的 20%,从而降低样品消耗和试剂成本,同时保持检测的灵敏度、质量和重复性。
常见问题解答
传统的抗体表征技术例如酶联免疫吸附测定 (ELISA) 存在一些局限性。这些技术通常很耗时,并且无法对同一个双特异性分子的两种相互作用提供定量功能评估。因此,评估复杂的双特异性疗法具有挑战性。此外,这些方法可能不适用于生物工艺或细胞株筛选中经常需要的高通量应用。
Octet® 生物层干涉 (BLI) 平台解决了这些限制,能够在高通量应用中对同一个双特异性分子的两种相互作用进行定量功能评估。
这些平台和试剂共同提供了免疫细胞活化和肿瘤细胞死亡的全面分析,支持研究免疫细胞-肿瘤细胞相互作用的多个方面,包括形态学变化、细胞数量和细胞因子释放。Incucyte® 平台的实时数据分析功能支持在 iQue® 平台上对流式细胞术测定的时间点进行合理的选择,从而实现更明智的实验设计和更高效的资源利用。
Incucyte® 活细胞分析免疫细胞杀伤试验可提供免疫细胞活化和肿瘤细胞死亡的形态学见解。目标细胞数量的测定可以指示免疫细胞引起的细胞毒性程度。